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【动物造模】-RT-qPCR检测Wistar大鼠黄嘌呤脱氢酶/氧化酶基因
转录水平方法的建立

  目的 建立实时荧光定量(RT-qPCR)检测Wistar大鼠黄嘌呤股氢酶/氧化酶(XDH/XO)基因转录水平的方法,以在转录水平上对XDH/XO基因进行定量检测。

  方法 提取Wistar大鼠肝脏组织中总RNA,经逆转录得到cDNA,以10倍为稀释因子稀释为5个浓度梯度,使用设计的引物序列和内参基因进行RT-qPCR检测,得到XDH/XO基因表达的标准曲线。进而检测Wistar大鼠高尿酸血症动物模型中XDH/XO基因转录水平的变化。

  结果 RT-pPCR法检测得到的XDH/XO基因标准曲线溶解峰单一,R2接近1,能检测出高尿酸动物模型中XDH/XO 基因转录水平的变化。

  结论 RT-qPCR检测Wisar大鼠XDH/XO基因转录水平的方法具有定量准确,重复性好的特点,可应用于高尿酸血症的发病机理、新药研究等方面。

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