动物造模 中国实验动物信息网 2022-03-23 546

　　目的：利用蛋白磷酸酶5（PP5）基因敲除小鼠，探究PP5在小鼠脂肪代谢中的作用。

　　方法：随机选取6周龄雄性PP5基因敲除（PP5 KO）和野生型（WT）小鼠，高脂饲养6周后，应用HE染色和油红O染色技术对小鼠肝脏结构和脂滴积累进行检测，应用Western blotting和real-time PCR技术检测肝脏组织中脂代谢相关基因的表达情况。同时应用PP5 KO和WT小鼠成纤维细胞，在体外观察PP5对脂肪分化的影响。

　　结果：与WT小鼠相比，高脂饲养后PP5 KO小鼠体重与WT小鼠相比显著减轻，肝脏中脂滴数量显著较少且脂滴较小。体外实验发现与WT小鼠胚胎成纤维细胞（mouse embryonic fibroblast，MEF）相比PP5 KO MEF细胞脂肪分化显著较弱，脂滴较小。此外，在PP5 KO肝脏组织中脂肪分化标记基因CD36、AP2、PPARγ2和Glut4的相对表达量显著降低，而能量代谢相关蛋白糖皮质激素受体（GR）的磷酸化水平显著增加，解偶联蛋白1（UCP1）表达量也显著升高。

　　结论：PP5通过调节GR的去磷酸化影响机体脂肪分化和能量代谢调控小鼠脂肪代谢。