HIV病毒,动物模型 中国实验动物信息网 2020-08-12 665

　　(1)复制方法

　　①HW-1的长末端重复序列(LTR)与指示基因连接转基因小鼠，即将LTTR基因与指示基因-氯酶素乙酰转移酶(CAT)连接后导入小鼠细胞。

　　②HW-1的tat转基因小鼠，即将ARV-2(AIDS- associated retrovirus strain 2)病毒的tat基因序列与HIV-1的LTR连接，并导入PML质粒，该tat序列为179个碱基，编码第8-66位氨基酸。然后将该片段注入CD-1雄性小鼠与C57BL/6×DBA雄性小鼠交配的受精卵细胞。出生小鼠经Southern blot检测，部分小鼠在皮肤上有该序列的表达。

　　③HIV全序列前病毒DNA转基因小鼠，即建立HIV-1全序列前病与SV40的T和t抗原基因连接后所建立的转毒DNA转基因小鼠，是完整的全病毒基因小鼠。

　　(2)模型特点

　　①HIV-1的长末端重复序列(LTR)与指示基因连接转基因小鼠的眼、心脏、胸腺、尾部等处检测到组织特异性 CAT的表达。外周血淋巴细胞和单核细胞在pHA或者细胞因子联合培养时亦能表达CAT活性，而皮肤朗格汉斯细胞中CAT的活性*高。用免疫细胞化学染色技术在大脑皮质、基底神经节和小脑胶质细胞或小神经细胞中检测到 HIV-1的LTR转录活性。尽管这种转基因小鼠在多脏器、多组织中表达了HIV-1的LTR基因，但只表达而不致小鼠产生相应的疾病。

　　②HIV-1的tat转基因小鼠的雄性小鼠的皮肤病变表现为梭状细胞增殖与发展，但雌性小鼠有皮肤病变或者肿瘤发生，且同时有肝癌高发趋势。此时，肿瘤的发生与发展是由tat基因介导的、从皮肤释放的生长因子间接影响所致。还发现。这种转基因小鼠模型中有相当部分的动物在皮肤上发生了类似于人类的卡波西(Kaposi)肉瘤的生长，这可能是由HIV-1，尤其是tat基因产物所致。

　　③对于HIV全序列前病毒DNA转基因小鼠，尽管完整的全病毒基因拷贝已证实在小鼠中得到表达，但是基因的表达和疾病的征象并非能在所有小鼠中发现。将一只表达全序列基因雌性小鼠和正常雄性小鼠经有性繁殖所产的F1子代生长十分缓慢，肺部的血管周围有淋巴细胞浸润，尾部、耳朵、鼻子、足部等处表皮增生，以及发生淋巴结病和胸腺萎缩等。但是选择性地破坏T淋巴细胞和人的AIDS样疾病表型没有在F1子代中观察到。HIV-1的病毒颗粒能从受累的F1子代中分离到，而且有感染人CD4阳性细胞的能力，但不感染鼠成纤维细胞。

　　(3)比较医学  HIV-1已被证实为AIDS的病原体。虽然HIV-1的感染和AIDS病发生之间的关系至今尚不清楚。建立AIDS的动物模型对研究HIV-1引起的免疫缺陷和测定疫苗效果或抗病毒制剂的治疗效果等都是不可缺少的工具。至今已有众多的动物如黑猩猩、长臂猿、恒河猴、家兔、猫等被试用于HIV-1感染的动物模型，然而，由于某些大动物的来源、经济等原因，HIV-1的动物模型尚无令人满意的报道。而小鼠作为动物模型越来越受到各国学者的重视。但是由于小鼠本身没有CD4受体，而无法用于HIV-1的研究。近年来。转基因小鼠和严重联合免疫缺陷小鼠(SCID)的研究成功，使小鼠用于HIV-1的研究和ADS的抗病毒治疗以及疫苗效力等研究的动物模型有望成功。