动物造模 中国实验动物信息网 2022-07-27 620

　　目的： 构建全长与成熟形式IL-37b 的真核表达载体pEGFP N1/ IL-37b,检测二者在RAW 264.7 细胞中的表达情况。

　　方法： 以含IL-37b 全长编码区基因的质粒pUBC/ IL-37b 为模板,构建能够表达全长与成熟形式IL-37b 的真核表达载体?将构建的重组质粒pEGFP N1/ IL-37b 转染到RAW 264.7 细胞中,通过western blot 和共聚焦显微镜检测全长与成熟形式的IL-37b 的表达情况,并通过real-time PCR 检测全长与成熟形式IL-37b 对LPS 诱导的IL-6 表达的抑制作用。

　　结果： 构建的pEGFP N1/ IL-37b 转染后能够在细胞中表达全长与成熟形式的IL-37b,并且能够抑制LPS 诱导的IL-6 的表达。

　　结论： 成功构建了全长与成熟形式IL-37b 的真核表达载体,为进一步研究IL-37b 的炎症抑制作用与机制打好基础。