动物模型,抑郁症 中国实验动物信息网 2020-08-12 1057

　　(一)神经生化功能改变模型

　　方法一

　　1.造模材料  动物：健康纯种小鼠，雄性，4～5周龄；药物：利舍平。

　　2.造模方法  于小鼠尾静脉注射2mg/kg利舍平后观察10h。

　　3.造模原理  利用利舍平的拮抗作用建立抑郁症动物模型。

　　4.造模后一般变化  在注射利舍平后半小时出现眼睑下垂，1h后出现运动不能，不能超出直径5cm的范围，身体蜷缩，受到外界刺激反应迟缓。

　　5.造模后生化变化  对照组小鼠脑内去甲肾上腺素(norepinephrine, NE)、5-HT含量分别为(220.90±3.40)ng/(ml·g)，(390.99±6.93)ng/(ml·g)；造模组小鼠脑内 NE、5-HT含量分别为(176.03±2.70)ng/(ml·g)，(174.98±9.32)ng/(ml·g)，两组间存在显著性差异。

　　方法二

　　1.造模材料  动物：健康纯种小鼠，雄性，4～5周龄；药物：利舍平；器械：水槽。

　　2.造模方法  于尾静脉注射半量利舍平(1mg/kg)，然后将小鼠四肢绑扎固定于木板，浸入20℃左右水槽中，水面深至剑突部位，持续浸泡10h后，将其取出观察。

　　3.造模原理  利用环境刺激造成应激状态后加半量利舍平造成抑郁动物模型。

　　4.造模后一般变化  造模初期出现急躁、焦虑、烦躁、愤怒的表现。随着造模时间的延续，小鼠表现为倦怠、受到外界刺激反应迟缓，活动范围缩小，逐渐至直径为5cm的范围内。

　　5.造模后生化变化  对照组小鼠脑内NE、5-HT含量分别为(220.90±3.40)ng/(ml·g)，(390.99±6.93)ng/(ml·g)；造模组小鼠脑内NE、5-HT含量分别为(179.89±2.70)ng/(ml·g)，(176.96±9.25)ng/(ml·g)，两组间存在显著性差异。

　　(二)脑卒中后抑郁状态动物模型

　　1.造模材料  动物：雄性Wistar大鼠，体重250～300g；药物：麻醉剂，生理盐水；器械：止血钳，振荡器。

　　2.造模方法  在10％水合氯醛(400mg/kg)麻醉下，剪开大鼠头部皮肤，暴露颅骨，应用牙科钻分别在左侧颅骨钻6个孔，用眼科剪翻开左侧颅骨，暴露左侧脑硬脑膜，用虹膜剪轻轻剪开硬脑膜，露出软脑膜，使用蘸了生理盐水的棉签轻轻擦拭(在手术显微镜下)，至镜下见不到血管为止，缝合皮肤。

　　将动物予以夹尾1min、禁水24h、禁食24h、45℃环境5min、昼夜颠倒24h、水平振荡30min(160次/min)、4℃冰水游泳5min等方法刺激。这7种刺激每天随机采取一种，共安排3周。即包括：3次24h禁食，3次24h禁水，3次昼夜颠倒，3次4℃冰水游泳5min，3次45℃烘箱热烘5min，3次夹尾1min，3次30min高速水平振荡(160次/min)。每种刺激的操作方法如下：

　　(1)禁食：24h断料，即早7：00至次日早7：00不喂食。

　　(2)禁水：24h断水，即早7：00至次日早7：00不喂水。

　　(3)昼夜颠倒：于早7：00将动物放入昼夜颠倒箱中，不开灯使动物处于黑暗状态；

　　至晚19：00将昼夜颠倒箱的日光灯打开，使动物处于光照状态，直至次日早7：00取出。

　　(4)冰水游泳：将动物放入盛有4℃冰水的桶中(水深15cm)，大鼠的后足尖刚能触

　　及桶底，5min后将动物取出放回笼中。

　　(5)热烘：烘箱温度调至45℃恒定，将动物放入烘箱中，5min后将动物取出。

　　(6)夹尾：将大鼠放入固定笼中，露出尾部，用止血钳夹住距尾根1cm处(用力不要过大，使大鼠发出哀叫即可)持续1min后，将大鼠拉出放回笼中。

　　(7)振荡：将大鼠放入振荡器中，高速(160次/min)水平振荡30min后取出。

　　将动物单笼饲养。

　　3.造模原理  去除大鼠脑左侧皮层血管建立脑缺血模型，在此基础上加用孤养法和慢性不可预见的温和性应激方法，造成脑卒中后抑郁状态动物模型。

　　4.造模后变化  麻醉清醒后即出现了病灶对侧肢体轻度功能障碍；术后1～2周出现易激惹；术后1周肢体功能有所恢复；术后3周，即慢性应激2周后出现活动减少，常蜷缩少动，快感缺乏，提示卒中后抑郁(post stroke depression, PSD)大鼠模型已建立。

　　5.注意事项  手术器械严格消毒，防止手术感染，手术创伤应尽可能小，严格无菌操作。饲养室内尽可能保持动物的*适温度、湿度。

　　(三)大鼠慢性应激抑郁模型

　　1.造模材料  动物：雄性Wistar大鼠，体重250～300g；器械：止血钳，振荡器。

　　2.造模方法  将动物予以夹尾1min、禁水24h、禁食24h、45℃环境5min、昼夜颠倒24h、水平振荡30min(160次/min)、4℃冰水游泳5min等方法刺激。这7种刺激每天随机采取一种，共安排3周。即包括：3次24h禁食，3次24h禁水，3次昼夜颠倒，3次4℃冰水游泳5min，3次45℃烘箱热烘5min，3次1min夹尾，3次30min高速水平振荡(160次/min)。每种刺激的操作方法如下：

　　(1)禁食：24h断料，即早7：00至次日早7：00不喂食。

　　(2)禁水：24h断水，即早7：00至次日早7：00不喂水。

　　(3)昼夜颠倒：于早7：00将动物放入昼夜颠倒箱中，不开灯使动物处于黑暗状态；

　　至晚19：00将昼夜颠倒箱的日光灯打开，使动物处于光照状态，直至次日早7：00取出。

　　(4)冰水游泳：将动物放入盛有4℃冰水的桶中(水深15cm)，大鼠的后足尖刚能触及桶底，5min后将动物取出放回笼中。

　　(5)热烘：烘箱温度调至45℃恒定，将动物放入烘箱中，5min后将动物取出。

　　(6)夹尾：将大鼠放入固定笼中，露出尾部，用止血钳夹住距尾根1cm处(用力不要过大，使大鼠发出哀叫即可)持续1min后，将大鼠拉出放回笼中。

　　(7)振荡：将大鼠放入振荡器中，高速(160次/min)水平振荡30min后取出。

　　将动物单笼饲养。

　　3.造模原理  采用孤养法和慢性不可预见的温和性应激方法，造成大鼠慢性应激抑郁模型。

　　4.造模后变化  慢性应激和孤养模型的大鼠主要模拟了人类抑郁症的核心症状，即快感缺乏，表现为运动活动性减少、兴趣快感缺乏、探索行为减少、易绝望等特点，具有高度的有效性，并可持续几个月，基本符合抑郁模型的要求，是目前国外文献中广泛使用的模型。