动物造模 中国实验动物信息网 2023-02-07 750

　　目的 从脑胃饥饿素通路研究应激影响食欲的分子机制。

　　方法 32 只雄性Wistar 大鼠随机分为对照组和应激组，每组 16 只，每笼2 只。采用夹尾应激方法每日2 次，连续21 d 刺激大鼠，监测各组大鼠的摄食量及体质量; 在实验第7、21天每组各选取8 只大鼠，ELISA 法检测血清酰基化ghrelin 质量浓度;蛋白质印迹法检测大鼠胃及下丘脑中ghrelin 蛋白表达，以及下丘脑中腺苷酸活化蛋白激酶α2（Amp-activated protein kinase α2，AMPKα2）表达水平;实时荧光定量PCR 检测胃中ghrelin、生长激素促分泌素受体（growth hormone secretagogue receptor， GHSR）、瘦素（leptin），以及下丘脑中ghrelin、AMPKo2、神经肽Y（neuropeptide Y，NPY）、刺鼠基因相关蛋白（agouti-related protein，AgRP）mRNA 水平。

　　结果 实验第7天应激组每笼大鼠的总摄食量多于对照组（P<0.05），第21天两组大鼠的总摄食量未见明显差异（p>0.05）;在第7、21天，两组大鼠的体质量均无明显差异（P>0.05）。应激可以明显上调血清中酰基化ghrelin水平（P<0.01），胃及下丘脑中ghrelin 蛋白（P<0.05）以及下丘脑中AMPKg2蛋白（P<0.01）的表达也均明显上调。应激还能明显上调胃内 ghrelin 及 GHSR mRNA水平（P<0.01），下调胃内leptin mRNA水平（P<0.01）;同时上调下丘脑内ghrelin、AMPKα2、NPY 及AgRP mRNA水平（P≤0.01）。

　　结论 夹尾应激能导致大鼠中枢及外周ghrelin 水平的上调，可能对大鼠食欲暂时性增加有影响。