动物造模,慢阻肺 中国实验动物信息网 2022-10-13 632

　　目的 探讨二甲双胍(Met)调控微小 RNA(miR) -34a 对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠气道炎症的影响。

　　方法 每天烟熏 30 min,持续 30 d,并在第 1、14、28 天经气道滴注 2 mL 脂多糖(LPS)溶液制备 COPD 大 鼠模型,实时荧光定量 PCR(qRT-PCR)检测 Met 对肺组织中 miR-34a 水平的影响;支气管肺泡灌洗液(BALF)中白 细胞计数和 wright 染色分类检测 Met 对其影响;苏木精-伊红(HE)检测 Met 对肺组织形态影响;酶联免疫吸附 (ELISA)检测 Met 对血清中白介素 IL-6、IL-8、IL-1β、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平的影响;蛋白免疫印迹检测 Met 对肺组织中 sirt1 蛋白水平的影响;TargetScan 查找 sirt1 mRNA 的 3′UTR 与 miR-34a 结合位点,并经双荧光素酶报告基因检测试剂盒鉴定。

　　结果 与对照组相比,模型组肺组织中 sirt1 蛋白水平,单核-巨噬细胞比例降低(P<0. 05), miR-34a 水平、BALF 中白细胞数量,中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、淋巴细胞比例,血清中 IL-6、IL-8、IL-1β、TNF-α 水 平升高(P<0. 05);添加 Met 后可缓解肺组织中 sirt1 蛋白水平,单核-巨噬细胞比例降低,miR-34a 水平、BALF 中白细胞数量,中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、淋巴细胞比例,血清中 IL-6、IL-8、IL-1β、TNF-α 水平升高现象(P<0. 05);升高 miR-34a 水平逆转 Met 对 COPD 大鼠的影响。 并经双荧光素酶验证,miR-34a 与 sirt1 存在靶向关系。

　　结论 Met可下调miR-34a从而上调sirt1实现对COPD气道炎症的缓解,为临床上Met 治疗COPD提供一定的实验基础和依据。