动物模型 中国实验动物信息网 2020-08-10 1212

　　弥散性血管内凝血（弥散性血管内凝血综合征，DIC）是一种临床获得性综合征，可能由于多种原因引起。在临床上，DIC主要表现为由微血管血栓形成和栓塞，出血，休克和微血管性溶血性贫血引起的多器官衰竭。 DIC表现出一系列严重的临床病理表现，其主要特征是在激活血管内凝血机制后逐渐失去限制性或代偿性控制。 DIC的发展及其发展机理非常复杂，许多影响因素尚未完全阐明。不管是原发疾病还是DIC的诱发，机体凝血系统的激活均以连续不断的反应级联以及放大或限制凝血反应的正反馈和负反馈为特征。 DIC通常表明纤维蛋白分布在各个器官中，导致器官衰竭。抗凝治疗是阻断DIC病理过程的关键措施之一。其目的是抑制广泛的微血栓性病理过程，并防止进一步消耗血小板和各种凝血因子。它可以恢复其正常含量，并为恢复正常的血液凝固和抗凝平衡创造条件。因此，为实验研究建立理想的DIC动物模型非常重要。

　　1聚合葡聚糖诱导的大鼠弥散性血管内凝血模型

　　（1）复制方法250-400 g，10个月大的雄性Wistar大鼠体重。腹膜内注射30 mg/kg体重的戊巴比妥钠麻醉，将大鼠固定在背部的手术台上，并定期对颈部皮肤进行消毒以去除毛发。通过无菌手术暴露颈动脉和静脉并分别插管。通过颈静脉注射以15 ml/kg体重的130 g/L聚合物右旋糖酐（分子量480000）进行1或3分钟。给药前10分钟，给药后10、20和30分钟，以及在显微电视视频中，观察下回肠的肠系膜血管（*和第二小动脉以及*和第二小静脉），观察微循环。血流状态和血浆微血流）;血凝;给药后30分钟，从模型大鼠的颈动脉采血，检测相关的凝血功能指标，并进行血浆鱼精蛋白超凝试验（3R测试）;主要观察指标：模型大鼠微循环积分值，全血粘度，血浆粘度，相对粘度，血小板粘附率和聚集率，血小板计数，血浆凝血酶原时间，纤维蛋白原水平和精神分裂症测试。注射后30分钟将大鼠麻醉并处死，并用10％甲醛溶液固定肺，肾，心脏和其他组织，并进行正常组织切片，HE染色和光学显微镜下的形态观察。它是

　　（2）模型特征：模型动物的微血管流量有明显变化。输注聚合物右旋糖酐后，流速降低，血细胞停滞并聚集，微血流量减慢，并出现严重的微循环障碍。当使用天牛微循环加权积分标准计算流体状态积分时，模型大鼠的流体状态积分显着高于实验前和正常对照动物的流体状态积分，而小于小动脉。事实证明，这些动脉变化更为明显。建模后，模型动物的血小板粘附和聚集速率显着增加，血小板计数显着降低，凝血酶原时间延长，纤维蛋白原减少。与正常动物相比，存在显着差异，模型动物中的所有3R测试均为阳性。显微镜下的组织病理学观察表明，在模型大鼠，特别是肺中发现了纤维状和混合血栓，在血液涂片中发现了许多血吸虫细胞。以这种方式复制的大鼠DIC模型属于急性形式，其特征在于减少了凝血因子的消耗，次级纤溶系统的过度活跃以及血液流变性和微循环的明显损害。该模型创建方法简单，适用范围广，效果稳定。

　　（3）比较医学。该模型的致病机理是当静脉内注入聚合物右旋糖酐时，模型大鼠微血流的微积分值增加而血流减慢。血液流动性异常会导致人体血管运动。功能障碍为DIC的发生创造了条件。目前，无论血管收缩，血流量减少或血管舒张，停滞，它都无助于局部去除促凝剂和活化的凝血因子，但对纤连蛋白（FN）有益在本地解决。此外，注射聚合葡聚糖后，模型动物的血液粘度，血浆粘度，血小板粘附和聚集显着增加，从而导致异常的血液动力学。异常的血流动力学与血流阻力的变化密切相关，因此，增加血液粘度会显着增加血流阻力。*直接的后果是，它对微循环造成明显损害，损害包括内皮细胞在内的组织细胞，并随后加剧微循环损害，这种恶性循环促进了模型动物中DIC的发展。 ..该模型的疾病特征与临床患者中的DIC相似，使其适合DIC药物治疗和药物筛选的实验研究。

　　2脂多糖诱导的兔弥散性血管内凝血模型

　　（1）复制方法将戊巴比妥钠以30 mg/kg体重的剂量注射到体重约2 kg的雄性新西兰兔中。并在麻醉后麻醉兔子。仰卧并固定在手术台上，并定期对脖子上的皮肤进行消毒以去除头发。在无菌颈部手术过程中切开一个切口，将左颈总动脉钝切开，结扎动脉的远端，并使用18G静脉插管针刺穿并固定以准备收集样本。将2.5mg/kg体重的脂多糖缓慢注入家兔的耳静脉，每小时注入两次，每种脂多糖的注入时间为约10分钟。为了检测活化的部分凝血活酶时间（APTT），纤维蛋白原，血小板计数，抗凝血酶III和血清纤维蛋白降解产物（FDP），分别在注射脂多糖之前，注射后2、4和6小时注射兔子。我收集了血液。在建模结束时，将动物麻醉并处死，收集心脏，肺，肾脏，脾脏和肝脏组织，用10％甲醛溶液固定，制备常规组织切片，并用HE染色，用光学显微镜观察。

　　（2）模型特征注入脂多糖后，模型兔的活化部分凝血活酶时间显着延长，血小板计数和纤维蛋白原显着降低，抗凝血酶III活性显着降低，血清FDP显着降低。没有明显变化。显微组织病理学观察显示在模型血栓形成的心脏，肝脏，肺，肾和脾脏中有微血栓形成，大量炎性细胞渗入肺组织。 （3）比较医学DIC是一种弥散性和隐藏性的血管内凝血现象，不断消耗人体的凝血因子，并在临床上可能导致患者大量出血。 ..在创建该模型的过程中，当注射脂多糖后血液渗入兔子的静脉穿刺部位时，动物显示出呼吸频率显着增加，发，血小板计数逐渐减少以及APTT显着延长。有经验的我们在肺，肝，肾和脾组织中都有血纤蛋白血栓形成，表明静脉注射脂多糖可以成功复制兔DIC模型。但是，模型动物的血液FDP没有明显变化，脂多糖引起的DIC主要是消耗性凝血，纤溶活性没有明显变化。同时，注射脂多糖后的模型动物中的APTT显着延长了2、4和6小时，从而在脂多糖诱导的DIC过程中激活了人体固有的凝血途径。然后，人体可以通过外部和内在途径产生凝血酶。后者具有广泛的促凝作用和血栓形成作用。以这种方式复制的DIC模型表明，纤维蛋白分布在多个器官中，并且可以在模型动物中引起多个器官衰竭。 DIC模型的性能类似于临床人类DIC的性能，可用于DIC病因学和药物筛选的实验研究。