动物模型 中国实验动物信息网 2020-08-10 1165

　　多发性肌炎（polymyositis）是神经肌肉疾病中常见的自身免疫性疾病，细胞和体液免疫异常在破坏肌肉组织中起重要作用。

　　1大鼠肌炎模型

　　（1）复制方法取豚鼠骨骼肌，用刀匀浆器匀浆制备肌球蛋白，然后将其置于成年Lewis大鼠的背部和脊部。 5点钟，皮下注射弗氏完全佐剂（CFA）和等体积的肌球蛋白悬浮液。疫苗接种剂量为每点1 ml/kg体重，每周一次，连续4周。同时，腹膜内注射0.5 ml百日咳博德特氏菌原液，细菌数为4.0×10×10。

　　（2）模型特征大多数模型大鼠表现出诸如活动缓慢，摇摆，疲劳，虚弱，呼吸急促或呼吸困难，站立，滴头，食欲下降和生长缓慢等症状。我给你看了免疫4周后，在光学显微镜下，肌纤维表现出不同程度的变性，细胞质浑浊和肿胀，肌纤维的水平条纹模糊或消失，并分散并定位于淋巴细胞。在肌肉组织的基质中发现球体，并且某些肌肉纤维萎缩。组织切片的酶组织化学染色显示，心肌细胞中线粒体代谢异常，I型和II型肌纤维均涉及ATPase。大鼠血清中肌球蛋白特异性抗体的含量明显增加。伴刀豆球蛋白A诱导的T淋巴细胞的增殖是明显的。

　　（3）根据过去的比较医学研究，许多学者使用兔，豚鼠，人和鸡的骨骼肌匀浆免疫大鼠。比较结果，发现用豚鼠和人骨骼肌匀浆免疫的动物肌炎症状更严重。在该模型中，豚鼠骨骼肌肌球蛋白和完全弗氏佐剂用于免疫大鼠（刘易斯大鼠，近交系，对自身免疫反应更敏感），以在体内产生特定的免疫反应。越来越多地以这种方式产生肌肉抗体，豚鼠骨骼肌和大鼠骨骼肌具有抗原性杂交，*终形成了实验性肌炎的模型。

　　从动物临床体征和病理活检来看，这类似于人多发性肌炎。在实验中，B。与简单的皮下注射肌球蛋白和弗氏佐剂相比，大鼠对腹膜内注射百日咳原液的炎症反应已被乳化。该物质更为严重，与先前几项研究中腹膜内注射百日咳毒素的实验结果一致，但具体的作用机理尚不清楚。在多发性肌炎的发病机理中，细胞介导的体液免疫异常对肌肉的影响不同，但其中以细胞介导的免疫为主。通过这种方法创建的肌炎模型显示出模型动物肌肉组织中炎性细胞的浸润，肌肉纤维的变性，坏死，表明细胞介导的免疫反应参与了建模过程，该结果归因于肌球蛋白。形成免疫诱导。伴刀豆球蛋白A是一种T淋巴细胞刺激剂，可通过非特异性激活多克隆T细胞来增强全身性T细胞免疫力。因此，伴刀豆球蛋白A诱导的T淋巴细胞增殖代表了全身T细胞的免疫功能。

　　2豚鼠肌炎模型

　　（1）复制方法首先，使用新鲜的兔骨骼肌制备肌肉匀浆。切碎肌肉，加入pH 7.2ψ（H3PO4）= 20％的缓冲液，然后在冰水浴中用刀将匀浆器以1700/min的速度匀浆3次。每次为5秒，间隔为30秒。接下来，将其通过4层纱布过滤并且将滤液用研磨均质器以3000r/min均质化3次，每次5秒，以30秒的间隔均化。加入洗涤剂Triton-X-10，两者的比例为100：1、混合并在25009 x 10分钟（4°C）下离心。上清液是-20°C冰箱中的肌肉匀浆设备。在实验之前，将肌肉匀浆与弗氏完全佐剂2：1混合，每周一次在豚鼠颈背上皮下注射（0.2毫升肌肉匀浆+ 0.1毫升弗氏完全佐剂）。

　　（2）模型特征注射后1-2天，注射区域有0.5-1 cm硬结节，发红肿胀，1周后结节变软，起伏，溃疡，体温有些增加，*明显的是在2周时，伤口在4周时愈合，肿块逐渐减少，在8周时结实肿块。 4-6周后，会有不同程度的活动减退，体重减轻和皮毛变暗。注射后4周，肌肉酶（CK，LDH，AST）增加，并在6-8周达到峰值。肌电图表明，运动单位的时限显着缩短，振幅降低，多相波增加。在免疫的第4、6和8周组织组织。体格检查发现以骨骼肌多发炎为特征的病理变化：在显微镜下，横纹肌局部分布有肌细胞变性，坏死和炎性细胞浸润，基质增厚它显示出在小血管壁内和周围的炎性细胞浸润。在电子显微镜下，肌原纤维的明暗带消失，肌原纤维肿胀，破裂，空泡，线粒体凝结并空泡，束间间隙加宽，提示肌肉萎缩。

　　（3）比较医学：当人类发生多发性肌炎时，血清肌酶水平升高，而肌电图显示肌原性损害。显微镜下的组织病理学特征主要是肌纤维变性，坏死和炎性细胞浸润。兔骨骼肌和豚鼠骨骼肌具有抗原交叉反应性。通过用兔骨骼肌匀浆和弗氏完全佐剂多次免疫豚鼠而创建的肌炎实验模型，具有肌肉酶，肌电图和组织病理学的优势。这种变化类似于人类肌炎。