动物造模,年龄相关性黄斑变性模型 中国实验动物信息网 2021-08-12 1964

　　目的：通过慢性光联合对苯二酚喂养诱导小鼠年龄相关性黄斑变性模型的建立，观察其病理特征、超精细结构和视网膜功能的变化、AMD的发病机制，并为我们提供一种新的研究方法。

　　方法：20只4个月大的C57BL/6小鼠随机分为模型组和正常组，每组放置10只。模型组小鼠饲喂含8g/(kg?bw)对苯二酚的基础纯度合成饲料，每天2500lx光照12小时。正常组小鼠在正常光照下喂食不含对苯二酚的相同处方饮食，饲养3.5个月。使用视网膜电图（ERG）、光学显微镜和电子显微镜，我们观察了两组小鼠视网膜功能和结构的变化。使用TUNEL方法观察视网膜细胞的凋亡并使用免疫荧光。检测视网膜和脉络膜血管内皮生长因子 (VEGF) 和 CD31、表达和分布。

　　结果：ERG测试显示模型组视网膜功能低于正常组。光镜下模型组视网膜色素上皮萎缩，Bruch膜结构模型组感光细胞数为（164.67±34.37）个，正常组为（243.33±15.23）个。...模型组感光细胞数与正常组差异有统计学意义（t=-9.77，Pu003c0.05）。透射电镜显示模型组视网膜感光细胞膜盘结构松散变形，部分破碎。部分视网膜色素上皮细胞缩短，布鲁赫膜不规则增厚，外胶原层可见分层沉积，内皮细胞突入布鲁赫膜。 TUNEL结果显示正常组凋亡细胞很少，模型组视网膜色素上皮（RPE）和光感受器层出现大量凋亡细胞。光感受器凋亡率为（43±2.73）。 )?且两组间差异有统计学意义。意义（Pu003c0.01）。荧光抗体法结果显示正常组外丛状层和神经纤维层VEGF呈弱阳性表达。模型组除上述细胞外，RPE细胞层也可见强阳性染色。正常组视网膜各层细胞未见明显CD31阳性染色，模型组RPE细胞层CD31表达强，提示RPE层有血管新生。

　　结论：长期光照结合对苯二酚饮食的小鼠非常接近人类AMD的发病机制和特征，可为进一步研究AMD的发病机制和预防提供可靠的动物模型。