目的:评价登革热病毒实时荧光定量RT-PCR方法,并将其应用于登革热小鼠模型关键指标的检测。
方法:首先选择合适的特异性引物和探针,通过分子生物学方法制备质粒标准品,优化PCR体系和反应条件。接下来,我们将评估实时荧光定量T-PCR 方法的灵敏度、特异性和稳定性。验证了该方法对感染登革热病毒的小鼠的血清和组织样本的适用性。
结果:证实了一步法实时荧光定量RT-PCR方法。该方法灵敏度更高,*低检测线为49.6拷贝/μL。该方法特异性强,无非特异性扩增。稳定性和样品Ct值良好。所有标准偏差均小于 0.5、CV 小于 5?登革热病毒感染小鼠模型样本的检测结果符合实验预期。
结论:QRT-PCR方法可作为登革热小鼠模型病毒定量检测评价的重要指标检测方法。