动物造模 中国实验动物信息网 2021-07-28 1945

　　目的：探讨微小RNA（miR）-20a-5p调控氧诱导视网膜病变（OIR）小鼠血管内皮生长因子（VEGF）通路的机制。

　　方法：实验分为正常组、模型组、高氧对照组、miR-20a-5p高表达组，每组24只小鼠。除正常组外，其余各组小鼠均置于氧气浓度为（75.00±2.00）?氧气箱中，于出生后第7天建立OIR小鼠模型，小鼠保持正常连续5天的氧气状态，我都流口水了。高氧环境。高氧环境结束前1天，高氧对照组玻璃体腔注射1 μL磷酸盐缓冲液（PBS），miR-20a-5p高表达组注射1 μL miR-20a-5p . 我注射了它。玻璃体腔内放置激动剂（miR-20a-5pagomir）（1 μmol/L），模型组不做任何处理。正常组保持在空中，保持正常。高氧结束后，每组小鼠在正常空气中再饲养5天进行实验。采用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测视网膜组织中miR-20a-5p、VEGF、血管内皮生长因子受体（VEGFR）-1、VEGFR-2的表达。视网膜血管形态；苏木精-伊红（HE）染色用于计数视网膜新生血管内皮细胞的细胞核，免疫组化用于检测视网膜组织中的VEGF阳性细胞。

　　结果：模型组和高氧对照组，生后第17天，径向大血管从视盘向周围呈圆形不规则扩张，出现许多新生血管，其结构和分布较新，血管出现紊乱，外周毛细血管网闭塞；与miR模型组和高氧对照组相比，-20a-5p高表达组没有明显的从视盘到径向大血管的迂回。稻田。在 17 天龄的外周，血管不规则扩张减少，血管生成显着减少。与正常组相比，模型组和高氧对照组网络组织中miR-20a-5p水平降低（Pu003c0.05），视网膜血管内皮细胞核数、VEGF蛋白降低阳性区域。与模型组和高氧对照组相比，视网膜组织中VEGF、VEGFR-1的百分比和VEGF VEGFR-2 mRNA的表达水平增加了视网膜组织中miR-20a-5p的水平。 P \u003c 0.05)。 miR-20a-5p高表达组增加（Pu003c0.05），视网膜血管内皮细胞核数，VEGF蛋白阳性区域比例增加，VEGF、VEGFR-1、VEGFR-2 mRNA表达水平降低（P u003c0.05）。

　　结论：增加miR-20a-5p抑制VEGF通路，减少OIR小鼠视网膜血管生成，保护OIR小鼠视网膜。