动物造模 中国实验动物信息网 2022-01-22 1264

　　目的：建立高纯度肺微血管内皮细胞的分离方法，观察脂多糖（LPS）刺激后野生型小鼠细胞和晚期糖基化终产物（RAGE）敲除小鼠的受体。

　　方法：收集6-8周龄野生型C57和RAGE敲除小鼠的肺，用I型胶原酶消化，通过尼龙细胞过滤，用免疫磁珠从原代小鼠的肺中分离。 ..通过形态学和免疫荧光（PMVEC）识别细胞，用LPS（1mg/L）刺激不同时期，在激光共聚焦显微镜下观察细胞骨架F-actin的变化。

　　结果：显微镜下可见原代培养的PMVEC呈纺锤形或多角形，经细胞抗VIII因子相关抗原（VIIIF-Ag）染色高度纯化。 LPS 刺激后，RAGE 基因敲除小鼠的 PMVEC 骨未受损，但野生型小鼠重新排列形成应激纤维。

　　结论：免疫磁珠法可以获得高纯度的小鼠肺微血管内皮细胞，RAGE参与LPS介导的小鼠肺微血管内皮细胞骨架破坏。