动物模型,肝衰竭 中国实验动物信息网 2020-08-07 876

　　（1）模型方法：成年动物在麻醉下固定，沿腹部的中线打开腹部，并在肾静脉上方的下腔静脉用5-0血管缝线进行荷包线缝合。从小肠系膜的根部找到门静脉后，将其从肝门释放至脾静脉的水平，并结扎并切断门静脉的分支。肝素以100 U/kg体重静脉内注射。将门静脉夹在脾静脉的高度，然后在门静脉的门部分的叉下夹紧，切割并结扎。将抗凝剂分流管插入门静脉水平至脾静脉水平，结扎并固定，将下腔静脉穿过皮筋，并拉紧皮筋缝合线。在插入下腔静脉之前，使用非侵入性血管钳来阻塞钱包线缝合线上方和下方的下腔静脉中的血流。从肝十二指肠韧带释放胆总管，然后在十二指肠附近将肝十二指肠韧带双结扎以阻断所有肝动脉。或者，在剖腹手术后，松开门静脉和下腔静脉，对门静脉和下腔静脉进行端到端或左至右吻合，然后在此基础上关闭肝动脉。大鼠可以用血管夹直接临时钳住肝动脉，实验犬或猪在门静脉吻合术后24小时进行第二次手术，以临时钳住肝动脉4至6小时。我能做到。在整个模型建立和实验过程中，不断观察动物的血压，脉搏和意识，并记录其死亡时间。同时，动态地收集血液以制备用于肝功能测试的血清，并收集肝组织进行形态学检查。

　　（2）模型特征：完全切断流向肝脏的血液后30-60分钟，动物变得不安定并逐渐进入肝昏迷状态。收缩压随时间逐渐下降，并在75至155小时内死亡。死动物的肝脏呈深红色，暗淡无光，并散布着紫色斑点。由于切断了肝脏的血液供应，动物的血清ALT，AST，LDH和NH3逐渐增加，PT逐渐增加，而纤维蛋白原（FIB）和GLU逐渐减少。在显微镜下，肝脏中的血流被阻塞后2小时，Disch间隙明显扩大，中央静脉塌陷，肝内液泡变性，核化脓，核仁消失，细胞质消失。糖原颗粒被均质化并显示为粗大，面部内质网脱粒，线粒体水肿，部分溶解，核染色质积聚，核畸形，核中假核夹杂物形成，肝衰竭动物无法识别的肝脏我们发现小叶结构，不受规管的肝细胞排列，肝板解离和局部外观，以及片状肝细胞坏死。

　　（3）比较医学急性肝缺血模型目前是诱发急性肝衰竭的理想动物模型，其手术步骤包括门静脉吻合和供体肝动脉结扎。其中，有两种结扎供体肝动脉的方法：完全结扎和临时钳夹。前者是指完整的血液供应阻滞模型，门静脉和肝动脉的完全夹紧或结扎和闭塞。该模型动物的死亡率通常很短，具有类似于肝脏切除模型的特征，并且是不可逆的，因此可以对体外生物人工肝支持系统或与急性肝衰竭相关的颅内压进行短期评估。仅适合研究脑水肿的变化。在后一种情况下，在门静脉吻合之后，通过拉动夹子或吊线暂时夹持肝血管，并且在由于急性肝局部缺血导致的肝衰竭之后，肝脏被释放并且血液被输送到肝脏。恢复供应。缺血模型。后者在很大程度上与急性肝功能衰竭的程度和死亡时间有关，因为吻合和结扎肝动脉之间的间隔决定了侧支循环的次数。因此，吻合和肝动脉结扎时间间隔是模型制备的关键。该模型是可逆的，使其适用于长期的生物人工肝支持实验和观察。当前，大多数生物人工肝的动物研究都使用这种方法，这是目前*理想的手术模型。