目的:探讨冻融小鼠体外受精后注射Cas9的可行性。
方法:用新鲜的C57BL/6J小鼠卵子IVF后,原核胚胎(单细胞胚胎)和2细胞胚胎用cryotube法(EFS20/40)冷冻,第二天复活,稍后培养。我会的。比较冻融原核胚胎和 2 细胞胚胎的恢复率和存活率。将Cas9和稀释的细胞质同时注射到部分冻融原核生物和新鲜原核生物的胚胎中,培养成2个细胞,比较注射后的存活率和2个细胞的发生率。
结果:B6小鼠原核胚胎冻融后的恢复率是92.5吗?成活率 92.8?2 细胞胚胎恢复率 90.5?存活率95.8?一组数据,两者有显着差异(Pu003c0.05)。 Cas9 注射后新鲜原核胚胎的存活率是 92.7 吗?空白组的存活率是97.5吗? Cas9注射后预冻解冻胚胎存活率是82.6吗?空白组的存活率是97.5吗? 92?冻融组和各组之间的差异是不同的。重要 (P0.05)。注射后2细胞胚胎的发生率无显着差异(P u003c0.05)。
结论:冻融原核胚胎可用于Cas9显微注射。