动物造模,牛冠状病毒,荧光定量PCR 中国实验动物信息网 2021-06-25 960

　　目的：建立特异灵敏的牛冠状病毒荧光定量PCR检测方法,并对牛源性 样本进行筛查｡

　　方法：根据Genbank中登录的BCV的N基因序列设计TaqMan引物探针,建立基于TaqMan探针 法的BCVPCR检测方法,对收集到的牛源样本进行BCV筛查,并对部分阳性样本的PCR产物进行测序鉴定｡

　　结果：建立了能够特异检测BCV的TaqMan探针法荧光定量PCR检测方法,其标准曲线相关系数Slope为-3.417, 相关系数r2 为0.999,,扩增效率Eff为96.195%｡ 该方法检测BCV的敏感度为40 copies｡ 使用该方法检测64份 牛肛拭子样本检出率为1.5%,检测33份牛源生物制品检出率为6%,部分阳性样本的PCR产物经测序比对为 BCV核酸序列,说明BCV在国内牛群中流行,牛源相关生物制品中有感染BCV的潜在风险｡

　　结论：经测序验证, 建立的方法能够灵敏的检测样本中的BCV核酸,应加强牛源相关生物制品中BCV的监测,避免人感染BCV的潜 在风险｡