动物造模,MiR-31转基因小鼠 中国实验动物信息网 2021-10-09 1466

　　目的：构建稳定过表达miR-31转基因小鼠，检测主要组织器官中miR-31表达的变化，提供适合miR-31过表达体内应用的小鼠。

　　方法：使用Gateway克隆技术构建miR-31过表达载体，将使用DNA显微注射技术构建的载体注射到受精卵中，转移到假孕雌性小鼠体内自然产生。我会的。从新生小鼠尾部提取DNA，采用PCR和琼脂糖凝胶电泳鉴定miR-31过表达阳性小鼠，筛选、繁殖和繁殖阳性小鼠。收集另一只阳性小鼠，提取主要组织器官的miRNA，RT-PCR检测miR-31的表达。同时，我们比较了阳性和野生型小鼠神经系统中巢蛋白的表达和神经干细胞的数量。

　　结果：成功构建过表达miR-31的转基因小鼠，并在屏障环境中培育超过14代。 miR-31在所有主要组织和器官中的表达均升高且稳定。阳性小鼠的巢蛋白表达和神经干细胞数量高于野生型小鼠。

　　结论：利用Gateway克隆技术成功构建了过表达miR-31的转基因小鼠，miR-31在各代小鼠中表达稳定，神经系统神经干细胞数量较多，数量也较多。进一步研究 miR-31 在体内野生型小鼠的功能以及 miR-31 过表达后神经系统疾病的治疗将是小鼠的极好工具。