动物造模,牛病毒性腹泻病毒 中国实验动物信息网 2021-10-14 1444

　　目的：建立牛样本中牛病毒性腹泻病毒（BVDV）的双重RT-PCR检测方法。

　　方法：选取已发表的含有5'UTR区高度保守区的BVDV1和BVDV2基因作为靶基因，分别设计合成引物，建立双BVDVRT-PCR方法，确定性别的特异性、灵敏度和稳定性。方法学评价方法等同时，采用已建立的RT-PCR方法对41批含牛血清、牛血清脱蛋白提取物、脾多肽注射液的牛源样品和64份牛血浆样品进行检测。奶牛源样本和 64 头奶牛临床样本。

　　结果：建立的BVDVRT-PCR检测方法与牛副流感病毒III型（BPIV3）、猪瘟病毒（CSFV）、日本脑炎病毒（JEV）以及BVDV1和BVDV2 DNA模板无交叉反应，*低检测浓度为每微升分别为 8.87 x 102 份和 6.31 x 102 份。 BVDV 1 型和 2 型 cDNA 即使在 -30°C 的冰箱中放置 12 个月也能检测到目标条带。使用建立的BVDVRT-PCR方法，检测出41批牛样本和64份牛血浆样本，核酸阳性率分别为14.6?29.7?

　　结论：建立的BVDVRT-PCR检测方法快速、特异、灵敏、稳定，可用于检测牛样本中的BVDV核酸。