动物造模,膝关节成纤维样滑膜细胞炎症模型 中国实验动物信息网 2021-10-07 1994

　　目的：建立Sprague Dawley（SD）大鼠正常膝关节滑膜细胞原代培养及脂多糖（LPS）诱导的成纤维细胞样滑膜细胞炎症模型。

　　方法：选择80-120 g SPF级未成熟SD大鼠，分离滑膜组织，原代培养至第3代，采用组织化学染色和EdU方法对FLS蛋白标志物进行波形蛋白标记，并检测增殖功能。同时，以滑膜组织为对照，检测原代培养第3～8代FLS的特征蛋白表达，具有较高的纯度和生理功能，可用于后续实验。被筛选。 LPS诱导FLS炎症后，在LPS刺激FLS的不同时间检测IL-1β和TNF-α的mRNA和蛋白表达，并根据实验结果在LPS成功诱导FLS炎症模型时进行判断。*后，我们检测了 LPS 诱导 FLS 前后细胞因子、增殖功能和特征蛋白的表达，为 FLS 炎症模型的分析提供实验数据。

　　结果：我们使用 0.2? 型胶原酶消化法成功培养了 FLS 原电池。蛋白标记波形蛋白检测后，第三代FLS纯度达到98?上。由于FLS的蛋白质检测特性，具有生理功能、可作为后续实验的FLS被选为3~7代原电池。 LPS诱导的FLS细胞因子和特征蛋白的分析表明，1μg/mL LPS可以诱导FLS细胞3小时并复制FLS炎症模型。

　　结论：LPS诱导的FLS炎症模型可作为体外研究炎症性关节病的细胞模型。