种植体周围骨缺损,动物造模 中国实验动物信息网 2023-01-16 746

　　植入物修复已在临床上得到越来越广泛的应用，但通常与由于创伤，肿瘤，牙周疾病和其他原因导致牙齿脱落后牙槽骨的过度吸收有关导致更多的骨量并限制了义齿的覆盖范围。王荣和他的同事使用中国实验性小型猪将骨髓基质干细胞与羟磷灰石和磷酸三钙的复合物结合在一起，形成一种生物材料复合物。将其联合应用于植入物周围骨缺损，并分析了组织再生的植入物周围骨缺损的特征。

　　实验步骤：①骨髓基质干细胞的提取和分化：无菌从微型猪的As前棘中提取5至7 ml骨髓，并置于肝素化离心管中。应用密度梯度离心将细胞悬浮在含有10％胎牛血清的α-MEM培养基中，接种培养瓶并置于CO2培养箱中。 24小时后，细胞将附着在壁上，细胞将融合至80％的消化率并通过第二代细胞。 ②骨髓间充质干细胞的鉴定：消化第七代纯化的骨髓间充质干细胞并计数。将100μl含有1 x 10 6个细胞的细胞悬液添加到离心管中。添加200μlPBS，以1000/min离心5分钟，添加200μlPBS重悬细胞，添加FITC标记的CD71、CD44、CD34、CD45单克隆抗体，并使其在室温下在黑暗中反应1小时。 ，用低聚甲醛修复并通过流式细胞仪检测。 ③细胞和支架材料的混合培养：将细胞浓度调节至1×10 6/100μl，放入含羟基磷灰石-磷酸三钙载体材料的培养基中，轻轻摇动，在标准条件下培养，一天后等待.. （4）植入物周围的骨缺损并进行修复：在植入物底板的中壁上形成了直径3 mm，高度5 mm的圆柱形骨缺损。每组都包埋有BMSC-HA/TCP复合物，HA-TCP材料（80％磷酸三钙和20％羟基磷灰石），用Cellfoam膜覆盖并紧密缝合。将8只小型猪随机分为细胞支架组和支架组，每组4只动物，每组2只动物，分别在植入植入后1个月和3个月处死。分别收集材料，制作碎骨切片，用甲苯胺蓝染色，并进行组织学观察。实验结果：移植到细胞支架组一个月后，在中骨缺损中观察到新的骨形成，甲苯胺蓝染色变为亮蓝色，并形成了纯净的成骨细胞和辫状体。看到骨活动，看到活跃的增长。在为期3个月的组中，形成了良好的骨整合，主要是紧密的骨头，主要由含有大量Haval系统的成熟的紧密骨头组成。可以看出，大多数脚手架材料被降解并被新的骨骼所取代，血管在材料的空隙中生长，并且没有明显的炎症反应。有小梁骨形成和哈弗系统结构。支架组植入后一个月，支架材料与骨缺损中的植入物之间有明显的间隙，支架材料在3个月后逐渐变质，没有新骨形成。