动物造模,-EV71病毒,原代肾上皮细胞感染模型 中国实验动物信息网 2021-04-26 1168

　　目的：建立树鼩原代肾细胞EV71感染模型。

　　方法：通过胰蛋白酶消化获得树sh的原代肾细胞，用EV71感染树sh的肾细胞，并用Western blot和间接免疫荧光法分别对1、2、4、6进行测定，并在8℃测量培养上清液的病毒滴度。在每个细胞中，检测EV71病毒VP1蛋白的表达，并测定EV71病毒对虾原代肾细胞的感染性。

　　结果：将分离的Treeshrew原代肾细胞传代，纯化，形态学鉴定，并建立了基于Treeshrew原代肾细胞的细胞培养物。当EV71病毒被感染树感染的原代肾细胞后，病毒滴度在感染后48-96小时达到1.3×106 TCID50/mL，EV71病毒感染被树感染的原代肾细胞，表明它可以被有效感染。 Westernblot检测可在感染后2-8天有效地在树原代肾细胞中检测到EV71病毒VP1蛋白，并在感染后2-6天间接检测到细胞质中的病毒VP1蛋白分布。

　　结论：在成功建立Tree Schrew原代肾细胞培养物的基础上，确定了EV71病毒对Tree Schrew原代肾细胞的感染性和病毒生长特性，并确定了EV71 Tree Schrew原代肾细胞感染模型。