动物造模,肿瘤模型 中国实验动物信息网 2021-04-08 572

　　有很多方法可以复制动物肿瘤，例如，可以对实验动物进行辐照，可以通过静脉内或局部注射放射性同位素，以及使用各种化学致癌物（烷基化剂，多环芳烃，芳族胺，氨基偶氮染料等），使用硝酸胺）或使用植物毒素（psychados，saflors等）；使用金属（铬，镍，砷，镉等）；使用RNA和DNA癌病毒；各种致癌真菌毒素的用途（*具致癌作用）它们是黄曲霉毒素，可以诱导多种肿瘤。诱导的肿瘤模型的数量是诱导动物模型中的*个。致癌物通常用于通过口服，注射，植入和涂片在动物中引起肿瘤。

　　有许多报道说病毒可以诱发动物的肿瘤。例如，鼠白血病病毒（MLV），鸡白血病病毒（ALV）和猫白血病病毒（FLV）可以在大鼠，小鼠，鸡和猫中引起白血病。 ，分别。松散的鸡癌病毒可在多种动物中引起肉瘤，包括田鼠，鸡，鸭，鹌鹑，猴子和蛇。猫的肉瘤肉瘤（FSV）可以在大鼠，猫，狗和猴子中引起肉瘤。人腺病毒可在小鼠和野外小鼠中诱发肉瘤和淋巴瘤。

　　（1）诱导的肿瘤动物模型

　　1、肝癌二乙基亚硝胺（DEN）诱发大鼠肝癌：密闭一组雄性和雌性大鼠，重约250 g。按性别饲养在笼子里。除了常规食品外，还提供致癌物。即，使用0.25％的DEN水溶液每周一次强制以10mg/kg的剂量喂食胃，并将0.025％的DEN水溶液放入水瓶中。您可以在剩余的5天内免费喝酒。总共，它可以在大约4个月内诱发肝癌。或者，将0.005％的水与饮用水口服混合8个月，以单剂量使用来诱发肝癌。 4-2甲基氨基苯（DBA）诱发大鼠肝癌：以0.06％DBA饮食喂养大鼠，饮食中的维生素B2不应超过1.5-2 mg/kg。 4诱发大量肝癌。 -6个月。成功。 2-乙酰基氨基酸（2AAF）在小鼠，狗，猫，鸡和兔子中诱发肝癌。给成年大鼠喂食含有0.03％2AAF的标准饮食。每天平均2-3毫克2AAF（也可以将2AAF与油混合并喂养），在3-4个月后，80-90％的动物会发展为肝肿瘤。二乙基亚硝胺诱导大鼠肝癌。剂量为0.3-14毫克/千克体重/天，与饲料或饮用水混合，并且255/300只大鼠在6-9个月后患上肝癌。氨基偶氮甲苯（OAAT）诱发小鼠肝癌：每隔一天一次在动物两肩之间的皮肤上1％OAAF苯溶液（约0.1 ml含1 mg），每次2-3滴，一次通常100滴。实验后的7-8周出现了*个肝肿瘤，在7个月或更长时间内可以诱发约55％的小鼠肝肿瘤。或者，使用溶于向日葵种子油中的2.5 mg OAAT，每天间隔10天每天四次皮下注射C3H小鼠，可能诱发肝癌。黄曲霉毒素可诱发大鼠肝癌：每日饮食含有0.001至0.015 ppm。与饲料混合6个月后，肝癌的诱导率达到80％。

　　2、胃癌甲基蒽酚在小鼠中诱发胃癌：取约20 g的小鼠，并在无菌手术下通过腺胃粘膜表面的甲基胆蒽（MC）线结。包含MC的线的结由普通细线制成。将结扎成一端后，将结扎在装有MC的小玻璃试管中，然后稍微加热酒精灯以使MC液化并渗入。结。将MC浓度为0.05至0.1 g的20-甲基胆甾烯放入10至20条螺纹中。胃癌可以在手术植入后的4-8个月内成功。在不对称亚硝胺剂量为0.25 ml/kg体重的情况下，所有动物在3个月后都会发生前胃乳头状癌，其中有85-100％的动物会在7-8个月后发生前胃癌。昆明是*敏感的。 A线第二、而615线是*不敏感的。此外，亚硝基乙酸尿素甲酯可用于向BD大鼠的饮用水中添加2 mg/kg体重，每周喝5次。 520天后，所有大鼠均患上了腺胃癌。

　　3、食道癌甲基苄基亚硝胺（MBNA）诱发大鼠食道癌。摄入体重超过100克的Wistar大鼠，用含甲基苄基亚硝胺的饮用水喂养它们，并将MBNA与饮食混合，每日摄入量为0.75至1.5 mg/kg体重。 80-100天可诱发食道癌。您也可以使用二氢黄樟脑（dihydrosafrole），这是啤酒的调味料。在大鼠饮食中添加2,500至10,000 ppm的黄樟脑可导致20％至75％的食道癌。使用0.2％或0.005％的甲基苄基亚硝胺水溶液口服给予动物。每天一次，以1 mg/kg bw的剂量对大鼠进行灌注，并在第27天，第154天发现了一例食道乳头状瘤。食管癌的*例食管癌在11个月时的发生率为53％。

　　四。肺癌二乙基亚硝胺（DEN）诱发小鼠肺癌。每周一次给小鼠皮下注射1％DEN水溶液，每次剂量达到56 mg/kg，DEN的总剂量达到868 mg，观察时间约为100天。 ..合格率可以达到40％。当DEN的总剂量达到1176 mg时，观察时间约为半年，癌症的发生率可达到94％。氨基甲酸酯诱发的肺腺癌：小鼠（A系，1-11/2个月大）比大鼠更敏感，并且每隔3-5天腹膜内注射0.1-0.3 ml的10％氨基甲酸酯生理盐水。注意：总共注射2-3个月，每只小鼠的剂量约为100毫克，注射后3个月肺腺癌的发生率为100％，其中大多数是多重的。这种类型的诱发肿瘤是良性的。 ..此外，气管内注射如苯并py，硫酸铵气雾剂和甲基蒽蒽也可用于诱发肺癌。例如，每周一次将3,4苯并re注射到猴子的气管中（3-15毫克苯甲酸和相同量的Fe2O3混合物），总共10次注射.6只猴子中有2只肺鳞状细胞癌在动物中诱导。有人将硫酸胺气雾剂吸入100只大鼠。十三个月后，所有大鼠均患上了肺腺癌。将甲基茂蒽与0.2％明胶混合成悬浮液，并注入金色仓鼠的气管中。每周一次0.1毫升（含5毫克甲基胆碱），共6次。 53周后，这只动物患了病。肺癌。

　　五。鼻咽癌Dimethylcholantrene（MC）诱发大鼠鼻咽癌：取一根直径2-3 mm的硬塑料稻米管，将其拉入带有小火焰的酒精灯的锥形杯中。每个部分约3.5厘米长，并装有一个装有管的晶体MC。小管的一端被防火密封，以防止药物溢出，并用针刺破尖端，以使MC溢出阴茎。雄性和雌性均需服用约120克白色老鼠。乙醚麻醉后，将上述装有MC的塑料管通过前鼻孔插入鼻腔。它的特点是前鼻孔小而粗。申请。用很小的力将一根小管推入所有物体，尖端可以到达鼻咽腔。没有额外的固定，小管可以长时间留在鼻腔中。如果动物在给定的时间内（半年以上）自然死亡，则将鼻咽用10％福尔马林固定，脱钙，包埋在石蜡中，制成连续切片。癌症的发生率可达到60％或更高。二乙基亚硝胺鼻溢诱发的鼻咽癌：取大约120 g雌雄同体的白老鼠，麻醉乙醚，然后使用扁平的尖头8号针轻轻插入前鼻孔，针尖到达鼻孔腔。 。每周一次新制备的0.02 ml（含DEN6.7 mg）1％Tween-80的33.3％DEN悬浮液，每周注射15-20次，可能会诱发鼻咽癌。

　　6、取一只患有子宫颈癌的雌性小鼠，并在未麻醉的动物状态下，借助阴道扩张器和锋利的弯曲针，使用0.1 mg MC棉线将线绑在子宫颈上。从右子宫角后面通过并固定子宫颈结。线的另一端固定在背部的肌肉上，缝合皮肤。挂完线后，我在同一天连续注射2-3天的青霉素。防止术后感染。在某个时间点（大约半年）处死动物，并用10％福尔马林固定宫颈组织，包埋在石蜡中并连续切片。

　　7。结肠癌：对4周大的雄性大鼠皮下注射二甲基肼（DMH），连续21周，每次21 mg/kg DMH。*后一剂后1-4周处死动物。降结肠用Buan溶液固定，脱水，包埋在石蜡中并切成薄片。首先在母液中每100 ml含400 mg的DMH进行制备，然后添加37 mg EDTA，并用氢氧化钠（0.1N）溶液将pH值调节至6.5、以备后用。 （2）可移植的肿瘤动物模型

　　目前在临床实践中使用的大多数抗肿瘤药物是通过动物移植肿瘤试验中的筛选发现的。使用动物移植瘤筛查药物的好处是：一组动物同时接种相同数量的肿瘤细胞，生长速度相对一致，个体差异很小，接种的存活率几乎为100％。 ，对宿主的作用相似，可以将其连续移植到相同物种或品系的动物中，从而可以客观地轻松判断其治疗效果，并可以用于长期研究。测试周期通常很短，但是测试条件也易于控制。因此，大多数当前的抗肿瘤筛选使用动物异种移植物作为筛选模型。目前，世界上存储着约400种动物移植肿瘤，但是筛选试验中通常仅使用20至30种肿瘤。根据1984年的统计，我国已经在同一品系和种类的动物中建立了64种不同动物和人类的常见肿瘤株。例如，小鼠肺腺瘤（HP615），27号小鼠颈部肿瘤（U27），22号小鼠脑瘤（B22），小鼠淋巴细胞减少症（L615），裸鼠人肝肿瘤移植瘤和人脑恶性神经胶质瘤（NCS- 1））等。可以将动物肿瘤进行移植和继代培养，以培养所需的肿瘤细胞系。肿瘤菌株是具有稳定的组织学和增殖特性的肿瘤细胞模型，并且可以在同一菌株或动物中连续传代。将肿瘤移植到健康动物中等同于组织培养，并且可以长期保存肿瘤种类以用于实验。在实验中，腹水和实体瘤通常用于移植。对于产生腹水的肿瘤，可以将特定数量的细胞注射到受体动物的腹腔中以形成腹水肿瘤或产生腹水。实体瘤的移植也可以无菌进行，将实体瘤切成2-3毫米的小块，然后移植到受体动物的皮肤下。

　　自体动物的肿瘤移植不会引起排泄。同一只动物的移植可以与皮质类固醇，抗肿瘤药物和适量的放射线一起注射，以减少宿主的免疫排斥反应。异种肿瘤移植始于Leidy（1834），但这更加困难。在过去的50年中，以下方法已普遍用于同种异体移植中： （1）在皮肤或粘膜下接种具有易于观察的优点，但排斥反应大且效果不充分。 （2）将动物肿瘤移植到鸡胚尿囊中。一个特点是它很容易生存，但是人类肿瘤尚未得到很好的报道。 ③将人的肿瘤接种到大鼠，豚鼠和兔子的前房中。缺点是无法传代细胞。 ④移植到动物的大脑中。肿瘤生长迅速，但难以观察。 1983年，Badgen等人使用无胸腺大鼠将人肿瘤移植到肾囊下以筛选新药。所有实验仅用了11天，命中率很高。这项研究为临床患者的药物筛查提供了好消息。自1960年代以来，已在国外建立了数百种可移植的人类肿瘤。这些肿瘤菌株可以防止与传代相关的形成和功能下降。 1969年，Rygaaid率先成功地将人类肿瘤移植到无胸腺裸鼠中，为同种异体肿瘤移植开辟了新的领域。裸鼠缺乏T淋巴细胞功能，使其成为高度理想的肿瘤移植模型材料。