动物造模,乙肝病毒模型 中国实验动物信息网 2023-06-07 930

　　鸭乙型肝炎病毒（DHBV）由William等人于1980年引入。被发现。后来，在各种来源的鸭子，苍鹭和野鹅中发现了这种病毒。禽流感B型肝炎病毒的宿主范围非常狭窄，例如DHBV仅感染鸟类，如鸭和天鹅，而不感染美国鸭和鸡。

　　人类乙肝病毒和禽肝炎病毒有很多共同点。两种病毒均携带双螺旋DNA基因组的一部分。基因组复制取决于RNA中间体的存在。编码帧之间有很多重叠。基因区域。此外，这两种病毒在基因组和病毒结构，复制和病毒生命周期方面有很多共同点。两种病毒都是肝病毒。在DHBV模型中发现了许多肝营养病毒的感染特性。例如，病毒基因组复制包括RNA中间体的逆转录，共价闭合的环状cccDNA的形成和扩增，逆转录；以及病毒宿主方向的决定因素，这些都是HBV的生物学特性，对研究具有重要的参考意义。

　　同时，DHBV和HBV之间存在一些差异：DHBV基因组比动物乙型肝炎病毒稍小，两者之间的核苷酸序列同源性约为40％； DHBV基因组是Box，缺少编码禽乙型肝炎病毒的X基因只有两个包膜蛋白，而不是三个。当DHBV通过母鸭感染卵时，感染通常会导致慢性感染，但病毒感染通常不会引起肝脏损害，也不会引起肝脏疾病或肝癌。鸭子可以终生健康；成年鸭子摆脱了DHBV感染；当DHBV从雌性鸭子传给年轻的鸭子时，它会引起慢性感染，从而造成大部分肝脏损害，以及肝癌或肝硬化。成年鸭感染DHBV后，如果无法消除该病毒，则可能导致急性肝炎的发展。除HepaRG（从感染了慢性丙型肝炎病毒的肝癌患者的非肿瘤组织中分离出的人肝细胞系）外，仅原代鸭肝细胞对DHBV敏感。因此，DHBV的体外复制取决于原代培养的肝细胞。 DHBV可以在原代培养的鸭鸭或成年鸭肝细胞中复制。鸭胎儿肝细胞很容易从从未孵化的鸭胚胎中获得，并且可以在用胶原酶消化肝组织后进行洗涤和培养。当然，该细胞系包含除肝实质以外的细胞，例如巨噬细胞和成纤维细胞。另外，通过灌注成年鸭子的肝脏获得成年鸭子的原代肝细胞系，但是通过该方法获得的肝细胞系相对较纯（肝细胞的数量达到90％以上）。可以在含有氢化可的松，胰岛素和DMSO的标准培养基中培养原代肝细胞系，但是DMSO对于维持肝细胞分化和病毒敏感性非常重要。使用DHBV感染的体外模型，研究人员发现了许多与肝炎病毒复制周期有关的详细链接。建立鸭乙型肝炎病毒动物模型的优势在于，可以在动物中轻松测试鸭。此外，DHBV敏感的原代肝细胞可以很容易地从哺乳鸭和胚胎中分离出来。使用DHBV感染的鸭作为模型主要用于研究病毒cccDNA作为RNA转录模板在病毒复制中的作用。尽管鸭被DHBV感染后不会发展为肝癌，但是仍然有学者通过将病毒基因组整合到细胞肿瘤模型的细胞染色体中来研究病毒复制在癌症发展中的作用。

　　类似于人类感染HBV的发作。鸭子感染DFBV后，疾病的进程与年龄有关。一般来说，肝炎病毒感染可发展为急性或慢性感染。感染的结果与感染时使用的病毒数量有关。高剂量病毒感染会增加新生鸭会持续感染的可能性。感染过程中中和抗体的产生还决定了病毒感染后新生儿和成年鸭疾病发展的不同过程。成年鸭会迅速产生中和抗体，并能有效阻止病毒在肝脏中的传播。

　　在正常情况下，DHBV可以从雌鸭中垂直传播鸭卵，从而引起新生鸭的慢性感染。但是，由于免疫系统对病毒的抵抗力，动物没有任何症状。因此，所有由DHBV阳性母鸭出生的幼鸭均为DHBV阳性。在慢性感染的鸭子中，DHBV主要在肝细胞中复制。在正常情况下，病毒的复制水平很高，几乎所有的肝细胞都感染并表达病毒抗原，并且在外周血中可以检测到大量的病毒抗原，每毫升多达10个拷贝，还可以检测到病毒。同时，DHBV模型也被用于研究乙型肝炎病毒细胞受体，病毒变体生长曲线以及抗病毒药物的体内和体外评估。但是，已经发现鸭子与土拨鼠的不同之处在于它们对抗病毒药物的毒性不敏感。鸭的代谢系统与抗病毒药物的代谢过程兼容。因此，由于病毒与宿主肝细胞之间的差异，通过鸭乙型肝炎病毒模型评估的药物的临床应用价值仍然受到限制。