动物造模,角膜炎动物模型 中国实验动物信息网 2021-03-29 604

　　1单纯疱疹病毒方法

　　（1）复制方法（1）选择4至6周龄的雌性Balb/c小鼠（体重14至16 g），并以45 mg/kg体重的剂量腹膜内注射戊巴比妥钠...麻醉接下来，将其置于显微镜下，用方形的1 ml注射针划伤实验室小鼠的角膜上皮，并将5μl2×100000000 PFU/ml病毒（HSV-1RE株）滴到划伤的角膜上。 （2）在全麻（25mg/kg体重）下，通过兔子的耳静脉将3％戊巴比妥钠注射到体重为2.0至3.0kg的有色兔子中，并置于手术显微镜下。取一根直径为1.2 mm的毛细管玻璃管，吸出1 ml病毒株（使用HSV-I病毒株，在Hela细胞中孵育，离心，冷却至-70°C以备后用。将上清液保存在冰箱中。在接种过程中清除并重新武装病毒（1.15 x 100000000 PFU/ml），用塑料将一端封闭。兔子的眼睛是固定的，并且在整个角膜上接种了25个点。接种过程中，玻璃管必须垂直于角膜表面。根据Trefin手术，钻孔的深度仅限于角膜上皮层的穿透。 ..

　　（2）模型特征（1）模型小鼠在感染第三天时的角膜变得不如*天透明，并且出现典型变化的树突状病变，并且角膜变得浑浊消失。我做到了感染第7天的透明度。 （2）严重的树突状角膜皮炎出现在兔子的角膜上，严重者发展为地理性角膜溃疡。 （3）比较医学单纯疱疹病毒性角膜炎是一种反复发作的持续性疾病，其发病率和失明率在角膜疾病中*高。模型易于构建，周期短，并且可以在短时间内大量复制。病毒接种48小时后即可观察到。高灵敏度和均匀响应。 48小时后出现典型的树突状角膜炎。 ..该模型可以客观地反映出药物在早期阶段的快速消灭，从而抑制了角膜炎症，有效客观，准确地确定了药物的疗效，提供了一种手段。

　　细菌方法造成2眼损伤

　　（1）复制方法将体重2.0到2.5 kg的实验兔子饲养1周并进行适应后，在实验前检查两只眼睛。当将0.2-0.3 ml /只兔眼的眼睛涂抹smianxin时，兔眼会表现出3-5分钟的轻度局部麻醉，而用trefin按压角膜则无反应。使用直径分别为7毫米和4毫米的角膜曲霉素，轻轻推动角膜并将其顺时针旋转，从而造成圆形外伤。拉开眼睑，将其打开到杯子中，并用1毫升注射器吸入0.1毫升2 x 10 12升/升细菌液体（铜绿假单胞菌或化脓性链球菌），并将其滴入兔子的眼睛。

　　（2）模型特征细菌接种后24小时，模型动物可能会表现出典型的角膜炎症状。细菌培养在第1、3和5天呈阳性。显微组织病理学观察显示角膜水肿，充血，上皮细胞脱离，溃疡，伤口未愈合，炎性细胞浸润高。

　　（3）比较医学角膜是无血管的，其营养来自房水，泪腺和角膜缘毛细血管。细菌性角膜炎炎性阶段的上皮细胞和实质细胞释放蛋白水解酶，可以加深和扩大溃疡。结膜和泪腺也参与炎症反应，显示结膜，淋巴细胞和单核细胞的肿胀和充血。中性粒细胞。泪液会冲洗结膜囊和角膜表面。眼泪含有抗菌溶菌酶和免疫球蛋白，具有杀菌作用。但是，身体修复的速度与角膜损伤的程度，细菌致病性的强度以及感染细菌的数量密切相关。为此模型选择的革兰氏阴性铜绿假单胞菌和化脓性革兰氏阳性链球菌都是眼科病原性细菌，它们会产生多种分解酶，引起局部组织降解和细菌体炎症。组织被破坏，甚至穿孔。该模型方法简便易行，可用于眼科抗生素筛选的临床研究。