疾病动物模型,种植体周围骨缺损修复 中国实验动物信息网 2021-03-16 609

　　植入物修复在临床实践中变得越来越广泛，但通常涉及由于创伤，肿瘤，牙周疾病等导致牙齿脱落后牙槽骨的过度吸收，从而导致骨量不足和植入义齿。 Wangong等人用中国的小型实验猪将骨髓基质干细胞与羟基磷灰石和磷酸三钙复合物结合在一起，形成一种生物材料复合物，并与植入物周围的骨缺损结合起来，进行了应用并分析了植入物周围的骨缺损。组织再生的特征。

　　实验过程：（1）骨髓间充质干细胞的提取和分化培养的诱导：从小型猪的superior前上棘无菌提取5至7ml的骨髓，并将其置于肝素化的离心管中。进行密度梯度离心，将细胞悬浮于含10％胎牛血清的α-MEM培养基中，接种到培养瓶中并置于CO2培养箱中，24小时后，细胞附着在壁上，融合后80％消化。并传代，收获第二代细胞供以后使用。 （2）BMSC的鉴定：消化并计数纯化的第7代培养物的BMSC。向离心管中加入100μl含有1 x 106细胞的细胞悬液。加入200μlPBS，以1000/min离心5分钟，再加入200μlPBS重悬细胞，加入FITC标记的CD71、CD44、CD34、CD45单克隆抗体，在室温下于黑暗中反应1小时，然后固定与多聚甲醛。通过流式细胞仪检测。 （3）细胞和支架材料的组合培养：将细胞浓度调节至1 x 106/100μl，置于含有羟基磷灰石-磷酸三钙载体材料的培养基中，轻轻摇动，并在标准条件下培养7 I天。 （4）植入物周围的骨缺损和修复：在植入物床的中壁上形成了直径为3 mm，高度为5 mm的圆柱状骨缺损。将BMSC-HA/TCP复合物和HA-TCP材料（80％磷酸三钙和20％羟基磷灰石）移植到每组中，用Cellfoam膜覆盖并紧密缝合。将8只小型猪随机分为细胞支架组和支架组，每组处死4只猪，移植后1个月和3个月分别处死2只猪。分别收集材料，制作骨磨切片，用甲苯胺蓝染色，并进行组织学观察。实验结果：细胞支架组移植一个月后，在中骨缺损中观察到新的骨形成，甲苯胺蓝染色为亮蓝色，成骨细胞和编织骨排列整齐，并观察到活跃的生长。骨骼活动。在3个月的组中，良好的骨整合主要在致密骨中形成，并且可以看出，骨主要由成熟的致密骨组成，包括许多哈弗系统。可以看出，大多数脚手架材料被分解并被新的骨头取代，血管长入该材料的缝隙中，并且没有明显的炎症反应。有小梁的骨形成和Haval系统的结构。移植入支架组一个月后，支架材料与植入物之间在骨缺损处有明显的缝隙，三个月后，支架材料逐渐变质，未见新的骨形成。