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同种异体移植骨肿瘤动物模型怎么制备?

  [建模机制]同种异体移植是指移植到相同物种或相同家族的动物中,供体和受体之间的生物具有高度的共性,可在体内停留,生长和增殖,并繁殖肿瘤的进程。这很容易做到。通常选择6周龄以下的Sprague Dawley大鼠(该阶段的免疫功能尚未完全成熟),并且大鼠骨肉瘤细胞系UMR106用于异体骨的原位骨植入。该细胞系是1970年代的Sprague Dawley大鼠。放射性磷诱导的骨肉瘤细胞系*近已用于构建骨肉瘤的原位移植模型。它具有很高的致瘤性和很高的肺转移潜能,使其成为进行肺转移研究的理想细胞系。肿瘤细胞可以逃脱和生长而没有有效的免疫监视,从而导致更高的成功率。今天有许多细胞系或细胞系可供选择。许多细胞系广泛分布于世界各地,这些细胞的生物学特性相对较好地定义。背景信息通常很清楚,因此可以同时接种动物群。肿瘤细胞具有相同的生长速率,个体差异小,存活率高,易于控制和观察,所有这些都是有利于比较和交换科研成果的有利因素。

  [建模方法]

  1、在体外培养大鼠骨肉瘤细胞系UMR-106、以获得指数增长的细胞供使用。选择肌肉注射盐酸氯胺酮(0.1 g/kg)麻醉的30-40天大的雄性和雌性Wistar大鼠,用碘对下肢进行消毒,并选择上胫骨干physi端的内侧或下部股骨。进行外部切口以暴露要分离的皮下组织的骨表面,然后使用直径为1 mm的Kirschner线钻出明显消失的骨髓腔。然后使用12号输血针沿空隙沿对角线刺入骨髓腔,以钻出骨髓和松质骨。使用无血清的RPMI1640培养基在倾斜的通道中将骨肉瘤的初步细胞稀释至5x1000000/ml,将0.2 ml的细胞注射到每个骨髓腔中,用骨蜡密封,依次缝合肌肉膜和皮肤。消毒切口和绷带并滋养确保模型能够在4周内正常构建。

  2、兔子选择了VX2细胞系进行研究。通过将细胞悬浮液注射到兔子后腿的肌肉中来制备荷瘤兔子。一旦肿瘤在3周内发展成直径约5厘米的肿瘤,就切碎并放置新鲜的鱼状肿瘤组织。挤压200-400目细胞筛,过滤并用Hanks溶液洗涤。收集细胞悬液,以1500r/min离心3分钟,并将形成的沉淀重悬于汉克溶液中,得到1×1000000/ml的肿瘤细胞悬液,并将实验动物保持无菌。我被麻醉了。在右膝关节的骨下进行纵向切口。皮肤长约1厘米,并触及胫骨平台。 18G骨穿刺针穿过胫骨近端关节表面穿刺。穿刺针平行于胫骨干。针头进入骨髓腔,将穿刺针输送至2.0-2.5 cm,将针尖放在胫骨骨髓腔的上部中央,注射0.3 ml肿瘤细胞悬液,将针头拔出并去除皮肤。将被缝制。  [模型的特征]当将肿瘤细胞接种到大鼠中后,骨phy在移植到骨骼中3周后肿胀,并且在肿瘤区域皮肤下发现了许多曲折的细血管。切除的表面显示出皮肤内层的破坏和破坏,肿瘤侵入了软组织和空腔,肿瘤组织就像鱼。植入后,骨phy肿胀,肿瘤直径达到2-3 cm。肿块中等或略微变硬,并且骨皮质更明显受损。边缘上有一些转移灶,大小与肺门不同。移植后六周,肿瘤是一个巨大的球体,略微僵硬,切面上的骨s皮质消失,只有脊柱残端可见。在两个肺部均发现大量转移灶,大小不同,一些肿瘤融合并变灰。移植后七周,右下肢的肿瘤直径达到3-5 cm,广泛扩散到两个肺部,融合了肿瘤灶,基本上失去了正常的肺组织学特征。模型小鼠的自然存活时间约为7周。

  [模型的评估和应用]大鼠模型的成功率略低于裸鼠荷瘤模型的成功率,但是将接种后已生长或转移的肿瘤组织均质化可以提高成功率。尽管异体动物之间的排斥作用相对较弱,但不同环境的个体之间的生理状况差异很大,因此,也可以通过适当降低免疫力或改变疫苗接种方法来增加肿瘤的形成。有可能的。该模型测试周期短,动物成本低,饲养管理方便,因此被广泛使用。在兔模型中,通过在胫骨近端关节表面上钻一个孔,将肿瘤植入胫骨上,中胫骨的骨髓腔中。这将*小化对骨膜的机械损伤。另外,由于穿刺孔距离肿瘤植入部位相对较远,因此肿瘤不容易通过。该孔向外延伸。

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