兔骨髓间充质干细胞 中国实验动物信息网 2021-02-21 440

　　目的：研究腺病毒（Ad）载体感染和骨形态发生蛋白4BMP-4过表达对BMP-4对兔骨髓间充质干细胞（BMSC）体外增殖和软骨形成的影响。

　　方法：利用全骨髓粘附，分离获得骨髓间充质干细胞，继代培养以提高细胞纯度，并通过细胞形态学和流式细胞仪检测表面分子标志物以鉴定细胞，并建立了感染复数（MOI）梯度。组和反相差示显微镜用于通过流式细胞术确定*佳MOI； BMP4过表达对酶联免疫吸附测定（ELISA）和II型胶原（COLL II）细胞分泌的影响。 9（Sox9）和BMP-4；细胞计数试剂盒8（CCK-8）方法用于鉴定BMP-4过表达对体外BMSC增殖的影响。

　　结果：原代细胞为圆形，椭圆形和纺锤形。第二代细胞显示出典型的成纤维细胞状长纺锤形，具有螺旋状分布，并且具有造血干细胞表面分子标记CD34（1.94％）的低表达。 CD45（2.13％），CD44（98.2％），CD29（99.7％）和CD90（98.8％）的高表达。当MOI为100时，病毒感染效率高且细胞损伤*小，这是*佳MOI。与对照组相比，BMP-4的过表达显着促进了BMSC的生长，并可能分泌到软骨特异性指标COLLII，BMP-4和Sox9中（P\u003c0.05）。

　　结论：BMP4的过表达可能显着促进BMSC的软骨增殖和分化。