再生障碍性贫血,动物模型 中国实验动物信息网 2020-08-03 1056

　　再生障碍性贫血（再生障碍性贫血）通常是指原因不明的原发性骨髓生成综合征。它主要表现为低骨髓生成，全血细胞减少，贫血，出血和感染。

　　（1）化学毒引起的再生障碍性贫血的动物模型

　　[建模机制]化学药品的毒副作用会干扰骨髓生成并导致再生障碍性贫血。例如，在腺嘌呤肾毒性建模方法中，肾脏分泌的促红细胞生成素（EPO）是红细胞和巨核细胞分化和成熟所需的细胞因子。腺嘌呤可引起肾脏疾病并分泌EPO。失败然后导致红细胞和巨核细胞的造血功能受损。白消安具有选择性的骨髓抑制作用。单次致死剂量或多次低剂量均可导致造血干细胞和骨髓微环境受到抑制。通常使用环磷酰胺，其抗肿瘤和免疫抑制剂的副作用是骨髓抑制，这会减少造血细胞的产生。苯可以在肝脏中代谢，然后转化为对苯二酚和苯酚。对苯二酚和苯酚均可与骨髓DNA结合。它抑制其表达并导致血红蛋白合成受损。

　　[建模方法]

　　1、腺嘌呤诱发的肾性贫血的大鼠每天胃内给予300 mg /（kg·d），持续6周。获得肾衰竭的贫血模型。

　　2、白消安诱导的肾性贫血模型小鼠每天注射白消安10 mg/kg，持续8-9天。如果停药60天，则骨髓的造血功能可能会受到轻微抑制。剂量增加可能会加剧抑制作用。给大鼠单剂20-35 mg/kg白消安可显着抑制大鼠骨髓再生。每周给兔子服用15毫克/千克或30毫克/千克的白消安，当总量达到120-150毫克/千克时，可导致兔子再生障碍性贫血。

　　3、环磷酰胺诱发的肾性贫血小鼠模型小鼠腹膜内单次腹腔注射环磷酰胺100 mg/kg或环磷酰胺50 mg/kg腹腔注射，三天后重复注射或50 mg/kg皮下注射，隔天注射4次。

　　四。苯诱导的肾性贫血模型小鼠每天皮下注射0.5 mg/kg苯，持续2-3周。

　　[模型特征]化学模型后，外周血红细胞，白细胞，血红蛋白和骨髓粒细胞减少，未成熟粒细胞的比例增加，骨髓造血细胞的增殖能力减弱。但是，化学方法的缺点是建模时间长并且易于对骨髓造成永久性损害。  [模型的评估和应用]该模型利用了诱发再生障碍性贫血的药物的副作用，类似于人类再生障碍性贫血。该模型具有较高的成功率和稳定的结果，但是该模型的持续时间长并且容易造成永久性骨髓损伤。该模型为发展再生障碍性贫血的实验研究和筛选再生障碍性贫血的治疗剂提供了极好的实验方法。

　　（2）诱导再生障碍性贫血动物模型的物理方法

　　[建模机制]放射性物质侵入人体，引起DNA损伤，干扰DNA复制，抑制有丝分裂对诸如造血干细胞之类的活跃分裂和增殖细胞的强抑制作用可以减少动物中的造血干细胞和祖细胞，并破坏骨髓中造血细胞的增殖能力。

　　[建模方法]

　　1、用3-4 Gy剂量的X射线或60Co-γ照射的小鼠可以减少造血干细胞的数量，而8-9 Gy可以杀死大多数造血干细胞。

　　2、使用32P（32磷）给小鼠静脉注射1.4 mCi/kg体重会导致再生障碍性贫血。

　　[模型的特征]该模型使用暴露于致死性或致死性X射线或Co射线的小鼠，并发现其具有严重的造血功能障碍。外周血红细胞，白细胞，血红蛋白均明显减少，存在骨髓颗粒细胞系均低于正常水平，未成熟粒细胞的比例增加，巨核细胞也显着减少，骨髓细胞成长能力下降了。  [模型的评估和应用]该模型使用的可导致再生障碍性贫血的辐射因子与导致可再生障碍性贫血的人类辐射因子相似，并且成功率高且可获得稳定的结果。有一个优势。但是，它需要特殊的设备和保护。它为进行辐射防护研究提供了一种极好的实验方法。

　　（III）免疫介导的再生障碍性贫血动物模型

　　[建模机制]将不同品系小鼠的活性淋巴细胞共同注射后，产生免疫介导的作用，直接抑制骨髓生成和IL -2、IFN-γ和其他负性造血调节剂间接抑制骨髓生成。

　　[建模方法]选择DBM2小鼠作为6至14周的细胞供体，BALB/c小鼠和8至10周的雌性。胸腺淋巴结细胞悬液的制备：献血DBA/2小鼠，无菌摘除胸腺和淋巴结，例如颈部，上颌下颌，腋窝，腹股沟，肠系膜和少量生理盐水。加入，研磨并过滤以形成单细胞悬浮液。 ..台盼蓝活细胞确认细胞存活率应达到95％以上，并且应将细胞计数至使用所需浓度。在用60Co-γ射线5Gy全身照射BALB/c小鼠后，于当天通过尾静脉注入来自DBA/2小鼠胸腺淋巴结的混合细胞，输入细胞体积分别为1 x 1000000/0.2 ml。两个月后，处死动物，切除小鼠的双侧股骨，用剪刀将两个股骨切开以暴露骨髓腔，并吸出2mlPMI1640培养基。重复洗涤骨髓腔，收集所有骨髓细胞并充分混合，并在显微镜下计数骨髓。有核细胞，外周血显像和T细胞亚组测定，IFN-γ测定，组织学检查以及骨髓超微结构的观察。  [模型的特征]再生障碍性贫血组的实验小鼠从第8天开始逐渐失去无组织的皮毛，体重减轻和躁动不安，并在第20天之后逐渐死亡。尸检显示器官，胸腺和脾脏稀薄。淋巴结萎缩，一些小鼠的小肠有出血点。再生障碍性贫血组小鼠外周血和骨髓中有核细胞数量显着减少，T细胞亚群Th显着减少，Ts显着增加，IFN-γ显着增加。实验小鼠的骨髓增生非常低，有核细胞明显减少，造血细胞取代了大量的脂肪细胞，非造血细胞的数量增加;脾脏萎缩，小球体数量少。很少，形状很小。造血和基质细胞明显减少，不同类型的细胞耗尽了核糖体，线粒体肿胀并变性，显示液泡或髓样变性，无明显或消失的，内质网并有超微结构证据显示核膜有不同程度的肿胀，血液正弦松弛，浸出，出血和结构破坏。

　　[模型的评价与应用]对再生障碍性贫血进行了实验研究，观察到药物作用，筛选出有效药物，因此再生障碍性贫血的成功率高，结果稳定，发病时间短。具有集中注意力和推迟死亡的优势。提供了良好的实验方法。它通常用于研究再生障碍性贫血的病因并观察药物的作用。