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【动物造模】-miR-424对非小细胞肺癌细胞株A549迁移及侵袭的影响

  目的:探讨miR-424对非小细胞肺癌A549细胞迁移和浸润的影响。

  方法:RT-检测肺癌细胞NCI-H460,NCI-H1975、NCI-H446、A549,NCI-H1299,NCI-H157和人胚肺成纤维细胞MRC-PCR中miR-424的表达和脂质方法5 Lipofectamine TM2000将miR-424抑制剂和miR-424NC转移到A549细胞。 48小时后,RT-PCR方法检测到miR-424的表达,CCK-8方法检测到细胞的活力,划痕测试检测到的细胞迁移,transwell测试检测到的细胞浸润。 Westernblot检测基质金属蛋白酶2(MMP2),MMP9,转化生长因子-β1(TGF-β1)和p-Smad3的表达。

  结果:肺癌中的miR-424CI-H460,NCI-H1975、NCI-H446、A549,NCI-H1299,NCI-H157 [(1.78±0.13),(1.69±0.10),(1.89±0.18))细胞),(2.88±0.27),(2.52±0.20),(2.49±0.23)]表达水平是人类胚胎肺成纤维细胞MRC-5(0.58±0.05)表达水平下的miR-(P\u003c0.01)。明显高于424、与miR-424NC组相比,miR-424抑制剂组中的miR-424表达显着降低(P\u003c0.01),细胞活力降低(P\u003c0.01),细胞迁移和侵袭能力降低( P\u003c0.01),而MMP2、MMP9,TGF-β1和p-Smad3的表达水平显着下调(P\u003c0.01)。

  结论:miR-424表达的下调可能通过抑制TGF-β1/ Smad3信号通路来抑制A549细胞的迁移和浸润。

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