动物造模,骨髓间充质干细胞 中国实验动物信息网 2021-01-28 503

　　目的：探讨加味丹参汤对体外培养的骨髓间充质干细胞（骨髓间充质干细胞BMSC）向心肌样细胞分化的影响。

　　方法：通过粘附方法获得大鼠BMSC，并通过流式细胞仪检测细胞表面抗原。采用MTT法检测加味丹参汤对骨髓间充质干细胞的*大无毒浓度。由第三代细胞（正常对照组，加味丹参汤组，5-阿扎胞苷组，加味丹参汤+ 5-阿扎胞苷）诱导。 Western印迹检测组，细胞结合蛋白（desmin），α-肌球蛋白重链（α-MHC），每组的心肌肌钙蛋白T（cTnT）蛋白表达，RT-PCR方法检测GATA-4、缺口表达连接蛋白43（CX43）和Nkx2-5 mRNA。

　　结果：大鼠BMSC表面CD90的阳性率高于95％，CD34和CD45的阳性率低于5％。 BMSC加味丹参饮料的*大无毒浓度为0.625g/L。与正常对照组相比，加味丹参汤，5-阿扎胞苷组和加味丹参汤+ 5-阿扎胞苷组，GATA-4、CX43的结蛋白，α-MHC和cTnT蛋白的表达上调。并且Nkx2-5 mRNA表达水平上调，且差异具有统计学意义（P\u003c0.01）。与加味丹参汤组或5-阿扎胞苷组相比，加味丹参汤+ 5-阿扎胞苷组和GATA-4、CX43表达水平上调了Desmin，α-MHC和cTnT蛋白的表达。kx2-5 mRNA已上调。差异具有统计学意义（P\u003c0.01）。

　　结论：加味丹参汤可将骨髓间充质干细胞转化为心肌细胞样细胞，与5-阿扎胞苷具有协同作用。