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【动物造模】-裸鼠前列腺癌转移模型


  [建模机理]即使由于免疫缺陷而移植后,经过人肿瘤异种移植的裸鼠也生长良好。裸鼠体内移植的人类肿瘤的形态和功能特征与移植前基本相同。人前列腺癌应采用LNCaP细胞接种于裸鼠,并在小鼠之间进行同种异体移植,建立人前列腺癌的裸鼠异种移植模型。

  [建模方法]

  1、 BALB/c雄性裸鼠为3-5周龄,体重18-23 g。人前列腺癌LNCaP细胞系。

  2、消化并回收处于对数生长期的LNCaP细胞,取少量细胞液,使细胞浓度接近1×1000000000/ml。将裸鼠用乙醚麻醉,并用1 ml注射器抽吸200μl细胞溶液,并注射到裸鼠的腋窝下。每天观察植入部位,以了解肿瘤生长的潜伏期和生长速率。当肿瘤直径变为约10mm时,切除皮下实体瘤,用手术刀切成两半,一个用甲醛固定以进行病理检查,另一个放在平板上并使用F-12、孵化。用液体洗涤。去除中间的坏死组织,同时去除肿瘤组织周围的肌肉和血管,选择边缘的活细胞,切成约1立方毫米的等份,用培养基洗3遍,裸放置在小鼠前肢的皮下,进行异体移植和传代,移植到裸鼠中并保持无菌状态,当移植的肿瘤长到8-10毫米时进行实验我去了。

  3、模型试验(1)移植肿瘤的生长曲线:细胞接种后10天,移植后5天,定期观察肿瘤的生长速度,并测量其长度(a)和宽度(b)。计算肿瘤的体积。 ②肿瘤组织病理检查:用冷石蜡包埋10%甲醛溶液固定的肿块,切开组织进行常规苏木精-伊红(H&E)染色及免疫组化检查。

  [模型的特征] LNCaP细胞被皮下接种在裸鼠的前肢中,并在同种异体移植和肿瘤块之间通过,裸鼠的肿瘤移植成功率达到100%。

  【模型的评估和应用】移植肿瘤模型的优点是成功率高,周期短,肿瘤生长率一致,个体差异小,宿主存活时间和身体反应相似,客观判断简单。缺点是,与人体的原发性肿瘤不同,它不能完全代表原发性肿瘤的生物学特性。它更适合用于药物功效筛选和前列腺癌转移机制的研究。


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