目的:合成靶向NF-κB基因的高特异性shRNA腺病毒载体,观察其是否直接抑制体外培养的食蟹猴子宫内膜细胞的增殖。
方法:设计具有NF-κB-p65基因和空基因的shRNA腺病毒载体,体外培养中华mor猴子宫内膜细胞,分为实验组和对照组,将实验组分为NF-κB-。转染p65 shRNA。用具有空基因的腺病毒转染该组。共培养后,观察到细胞增殖活性,例如凋亡蛋白和细胞周期的变化。
结果:腺病毒载体的PCR和测序结果与预期结果一致,通过包装产生的病毒滴度为1.58×1011U/ml。F-κB-p65-shRNA腺病毒感染食蟹猴的子宫内膜细胞后,实验组子宫内膜细胞凋亡蛋白的表达水平明显高于阴性对照组(P )。u003c0.05、比较实验组和对照组的组明显增加,进入细胞分裂期的细胞数量明显少于对照组(P\u003c0.05)。
结论:携带NF-κB基因的腺病毒在体外感染子宫内膜猴后会加速子宫内膜细胞的凋亡并抑制子宫内膜细胞的增殖。该基因在子宫内膜猴的子宫中发现。