动物造模 中国实验动物信息网 2021-01-22 454

　　目的：建立一种分离高纯度肺微血管内皮细胞的方法，并观察脂多糖刺激的高糖化终产物基因敲除小鼠中的野生型小鼠细胞和受体。

　　方法：收集6至8周龄的野生型C57小鼠和RAGE基因敲除小鼠的肺，用I型胶原酶消化，用尼龙细胞过滤，并通过免疫磁珠法分离原代小鼠的肺。 通过形态学和免疫荧光鉴定微血管内皮细胞（PMVEC），并用LPS（1 mg/L）刺激不同时间段。用激光共聚焦显微镜观察细胞骨架F-肌动蛋白的变化。

　　结果：在显微镜下，可以看出初次培养的PMVEC是纺锤形或多边形，并通过细胞抗VIII因子相关抗原（VIIIF-Ag）染色得到了高度纯化。 LPS刺激后，野生型小鼠的PMVEC骨架会重新排列并形成压力。AGE基因敲除小鼠的光纤PMVEC骨架未损坏。

　　结论：可以通过免疫磁珠获得高纯度的小鼠肺微血管内皮细胞，RAGE参与LPS介导的小鼠肺微血管内皮细胞骨架的破坏。