胆汁螺杆菌,荧光定量PCR 中国实验动物信息网 2021-01-21 1090

　　目的：建立一种快速，灵敏，特异的实时荧光定量PCR检测方法，用于TaqMan探针定量检测胆汁中幽门螺杆菌。

　　方法：PCR扩增H.bilis保守基因P17序列全长ORF435bp，TA克隆，构建质粒标准pMD-HBP17。通过对pMD-HBP17标准品进行定量分析，优化了反应系统，以检测TaqMan探针实时荧光定量PCR方法的灵敏度，特异性和可重复性。通过建立的qPCR方法检测了77个临床样品，并与常规PCR进行了比较。比较测试结果。

　　结果：建立的qPCR检测方法显示出良好的线性和108-101个拷贝的质粒DNA浓度之间的相关性。所得标准曲线的斜率达到-3.46、相关系数达到0.999，检测灵敏度达到20。拷贝的77个临床样品的检出率为14.3％，高于正常PCR的检出率（7.8％）。

　　结论：所建立的H.bilisq PCR检测方法特异性强，灵敏度高，稳定性强，可用于幽门螺杆菌的定量和定性检测。