PC12细胞氧化应激和凋亡 中国实验动物信息网 2020-12-18 507

　　目的    探讨白桦脂醇对Aβ25-35诱导的PC12细胞氧化应激和凋亡的影响。

　　方法  以 40μmol/L Aβ25-35作用于 PC12 细胞,实验随机分对照组、Aβ25-35组、N-乙酰半胱氨酸组(NAC 组)和白桦脂醇 5、10、20 μmol / L 组,采用 MTT 法检测细胞的存活率,Annexin V-FITC/ PI 双染流式细胞术检测凋亡情况,JC-1 试剂盒检测线粒体膜电位,LDH、MDA、SOD试剂盒分别检测LDH、MDA和SOD 水平,比色法检测 caspase3、caspase8、caspase9 和 Cyt c 的 酶活性,Western blot 法检测凋亡相关蛋白 Bcl2、Bax、caspase3、caspase8、caspase9和Cyt c 的活性和表达。

　　结果  与 Aβ25-35组比较,白桦脂醇和NAC均对 Aβ25-35诱导的PC12细胞可提高细胞存活率和SOD活性(P<0. 01),并降低 LDH 释放率和凋亡率( P< 0. 01),抑制 caspase3、 caspase8、 caspase9 和 Cyt c 酶活性( P < 0. 01),同时下调 Bax、 caspase3、caspase8、caspase9 和 Cyt c 表达水平(P<0. 01),并上调 Bcl2 的活性和表达(P<0. 01)。

　　结论 通过预防给予有效剂量的白桦脂醇能够抑制 Aβ25-35诱导产生的细胞凋亡,其机制可能与减少 ROS 生成从而降低氧化应激水平,继而抑制细胞凋亡途径有关。