登革热小鼠模型 中国实验动物信息网 2020-12-09 701

　　目的　 评估登革病毒实时荧光定量ＲＴ-ＰＣＲ方法，应用于登革热小鼠模型关键指标的检测。

　　方法   首先，选择合适的特异引物和探针，分子生物方法制备质粒标准品，优化ＰＣＲ体系和反应条件；其次，评估该实时荧光定量ＲＴ-ＰＣＲ方法的灵敏性、特异性及稳定性；*后，验证该方法对登革病毒感染小鼠血清和组织样本的适用性。

　　结果　 成功确定一步法实时荧光定量ＲＴ-ＰＣＲ方法该，方法较为灵敏，*低检测线为４９.６Ｃｏｐｉｅｓ/μＬ，方法特异性好，未见非特异性扩增，方法稳定性好，样本Ｃｔ值标准差均小于０.５，且ＣＶ<５％，登革病毒感染小鼠模型样品的检测结果符合实验预期。

　　结论　 该QRT-PCR方法可作为关键指标检测方法，用于登革热小鼠模型病毒的定量检测及评估。