动物造模 中国实验动物信息网 2022-02-03 655

　　经常使用兔子，猪，大鼠，鸡，鸽子，猴子和狗。有几种常用的复制方法。

　　1、高胆固醇高脂喂养方法：这是一种死亡率低且长期观察的常用方法，但是需要时间。兔子，鸽子，鸡等在进食几周后通常会出现明显的高脂血症，几个月后会形成早期的动脉粥样硬化病变。大鼠，小鼠和狗的形成更加困难，但是蛋黄，胆酸和猪油可以添加到饮食中以加速。甲硫氧嘧啶，丙硫氧嘧啶，蛋氨酸，苯丙胺，维生素D，尼古丁或蔗糖也可以添加到高脂饮食中以促进病变的形成。

　　特定的生殖方法：兔挑衅模型：体重约2公斤，每天胆固醇0.3克，4个月后，肉眼可见主动脉硬化斑块。如果将每日剂量增加至0.5 g，则阻塞3个月后就会出现斑块；如果每天增加至1 g，则可以减少至2个月。在饲料中加入15％的蛋黄粉，0.5％的胆固醇，5％的猪油。 3周后，饲料中的胆固醇将被扣除，并将继续喂养3周。主动脉斑块的发生率可达到100％。它长到2000mg％。大鼠诱发的模型：1-4％胆固醇，10％猪油，0.2％甲基硫尿嘧啶，86-89％的基础饮食，7-10天或10％的蛋白质黄粉，5％的猪油，0.5％的胆盐，85％基本饮食，7天后会形成高胆固醇血症。小鼠诱导的模型：雄性小鼠饲喂1％胆固醇和10％猪油的高脂饮食，并且7天后血清胆固醇增加至343±15 mg；如果在饮食中添加0.3％胆酸，则为7天。继续饲养，血清胆固醇可高达530±36 mg％。用鸡和鸽子做模型：在4-8周大的湖泊中品尝鸡肉，在饲料中添加1-2％胆固醇或15％蛋黄粉，并在6-10周内添加5-10％的猪油。胸主动脉斑块的发生率达到100％，*高可达1000-4000 mg％，此后血胆固醇升高。鸽子每天饲喂胆固醇3克/千克/天，0.1克甲基硫氧嘧啶可产生更多的动物斑块。

　　2、免疫学方法：将白色大鼠主动脉匀浆注射到兔子体内可能会增加血液中的胆固醇，β-脂蛋白和甘油三酸酯。每隔17天注射4次，剂量为10 ml/kg /剂。内膜损伤率为88％，冠状动脉也有动脉粥样硬化病变。同时，饲喂高胆固醇饮食，病变更加明显。饲喂含1％胆固醇的饮料和静脉注射250 mg/kg牛血清白蛋白的兔子可能会加速高胆固醇饮食引起的内膜动脉病变的形成。

　　3、儿茶酚胺注射方法：每天向兔子注射1毫克去甲肾上腺素30分钟。一种方法是滴注15分钟，静置5分钟，然后注入15分钟。另一种选择是灌输5分钟，然后各休息5分钟。上述两种方法持续两周，可引起主动脉疾病，表明血管壁中层的弹性纤维被拉伸，分裂或破坏，并在疾病中出现坏死和钙化。

　　4、同型半胱氨酸注射方法：dl-同型半胱氨酸硫代内酯（dl-homocysteine thiolactone）20-25mg/kg/day（5％葡萄糖溶液中1mg/ml）约25天之内连续20次皮下注射，致动脉粥样硬化成年和幼兔均出现典型的动脉硬化病变。冠状动脉腔狭窄，基质显示动脉壁的内膜肌细胞增生，纤维化组织增生，弹性纤维断裂，血管壁增厚以及成堆的颗粒状和纤维状变色物质..当饮食中添加20％胆固醇并同时注射同型半胱氨酸硫代内酯时，所有动物都会出现明显的动脉粥样硬化病变。

　　5、表面活性剂输注：大鼠腹腔注射Triton WR1339 300mg/kg，在9小时后可使血清胆固醇增加3-4、而在20小时后，雄性大鼠的血清胆固醇仍是正常水平的3-4倍。然而，雌性大鼠的血清胆固醇水平约为6倍；在服用药物后约24小时，脂质升高作用达到峰值，并在约48小时内恢复正常。其中，甘油三酸酯的增加*强，其次是磷脂，游离脂肪酸和游离胆固醇，它们不影响胆固醇脂质。

　　6、胆固醇脂肪乳剂静脉注射法：在电磁加热和搅拌下分别溶解3 g胆固醇和猪油，加入Tween-803 g并充分搅拌，然后缓慢加入5 ml丙二醇和沸水混合物完成搅拌乳化并形成。 100毫升，在抽滤后在显微镜下确认，乳液颗粒是均匀的，可以在7-8μm或更小的范围内使用。向兔耳静脉注射5 ml/kg会立即增加血浆胆固醇和甘油三酸酯。总胆固醇比正常增加了六倍，其中游离胆固醇主要是游离胆固醇，游离胆固醇与总胆固醇的比例为90％。此后，血浆总胆固醇逐渐降低，在6小时出现一个低峰值，此后略有增加。 3-4天后，游离胆固醇与总胆固醇的比例接近正常水平（约40％），血浆胆固醇在7-14天后恢复正常。

　　7、幼鼠法：由于牛奶中的脂肪含量高和甲状腺功能异常，通常，幼鼠的血清胆固醇比成年鼠高2-3倍。使用正常饮食代替母乳喂养可以迅速将血清胆固醇降低到正常成年大鼠的水平。我们进行了一项实验，通过选择不喂奶的雄性和雌性小鼠，将30至50 g的白色小鼠母乳喂养25天，观察该药物降低胆固醇的效果，并将其与对照组进行比较。去做。通常认为这种类型的高胆固醇血症对甲状腺素及其衍生物非常敏感，但对某些胆固醇生物合成抑制剂不敏感。

　　8、替代方案：有许多因素可导致高脂血症和动脉粥样硬化。例如，动物的脑缺血，中枢神经系统的电刺激，高压力条件，鸟类中暴露于高水平的雌激素和一氧化碳以及对动脉壁内皮细胞的球囊损伤。

　　各种高脂血症和动脉粥样硬化动物模型的特征：除了田鼠和仓鼠，普通的温血动物，只要他们使用适当的方法，就可以形成动脉粥样硬化斑块病变可以形成。

　　⑴兔子是*早使用的动物，经常被用来创建高脂血症和动脉粥样硬化模型。外源胆固醇的吸收率很高，高达75-95％，在大鼠中仅为40％。它清除高脂血症的能力很弱，并且在静脉注射胆固醇后持续3至4天。狗在中间十二个小时。只要您给兔子喂高胆固醇饮食，就不需要其他因素。明显的动脉粥样硬化在3到4个月内形成，类似于在人体中发生的疾病，便于采集血液进行测试。但是，它也有一些缺点，包括需要达到高水平的血清胆固醇以形成斑块。目前，内部器官易于脂质沉积，寿命短，抗性低，并且容易因继发感染而死亡。此外，兔子是草食动物，它们的酯代谢与人类的完全不同。

　　[2]实验表明，冠状动脉病变主要发生在心脏的小动脉中，而人则主要发生在冠状动脉的大分支中。白老鼠使用白老鼠建立高脂血症和动脉粥样硬化模型。这具有喂食方便，耐受力强和类似饮食习惯的优点。由此产生的病理变化与人类早期相似，不容易形成类似于人类的晚期病变，也更容易形成血栓。正常大鼠的平均血清胆固醇为92.67±1.87 mg％。仅通过增加饲料中的胆固醇来增加血清胆固醇和动脉粥样硬化并不容易。为了增加胆固醇的吸收，有必要在饲料中同时添加胆酸，这会引起高胆固醇血症的药物，例如添加抗甲状腺药物；可以进一步增加血清胆固醇..

　　⑶白老鼠使用白老鼠创建实验模型的优点是便于药物的育种和存储，但采血不便，无法进行动态观察。这很困难，很少使用。

　　⑷鸡是杂食性动物，其食物类型与人类相似，因此只需在正常饲料中添加胆固醇即可形成粥样斑块。病变迅速发生，并可能伴有斑块钙化和溃疡。鸽子像鸡。提要很简单。[5]在饮食中添加胆固醇会导致主动脉硬化斑块的形成，从而导致心肌梗塞。由于鸽子的品种不同，动脉粥样硬化斑块的性质可能非常不同，这可能是由于个体之间脂肪酶活性的差异所致。猴子的情况与人类非常相似，并且无论正常的血脂，动脉粥样硬化病变的性质和位置，临床症状以及各种药物的治疗效果如何，猴子都与人类非常相似。但是，进一步的研究表明，不同物种对动脉粥样硬化的敏感性不同。

　　[6]一般认为恒河猴比较理想。高脂饮食1-3个月后，血清胆固醇水平可以达到300-600 mg％，同时可以看到动脉粥样硬化，这可能导致心肌梗塞。动脉粥样硬化病变的位置不仅在主动脉中，而且在冠状动脉，脑动脉，肾动脉和股动脉中。

　　⑺猪可能是研究动脉粥样硬化的理想动物模型。这是因为某些年龄较大的猪在被人类残留后会在动脉，冠状动脉和脑血清中形成动脉粥样硬化病变。与人类病变非常相似。仅喂养高胆固醇，高脂肪的饮食可以在相对较短的时间段（9-18个月）内引起实验性动脉粥样硬化。此外，探针穿刺以及高胆固醇和高脂肪饮食会迅速引起进行性主动脉和冠状动脉粥样硬化。猪模型的其他好处包括类人的解剖结构和生理学，相似的动脉结构，可用的确诊品种数，多胎，多窝和杂食。该尺寸足以进行各种外科手术和临床评估。用。猪也特别适合研究应激源与动脉粥样硬化之间的关系。猪模型的缺点是要花费一定的费用才能饲养它，而动脉粥样硬化的人为改变需要脂质代谢或动脉损伤基础的某些改变。