睾丸体外培养模型 中国实验动物信息网 2020-12-01 472

　　目的：通过探索适宜的培养条件，建立小鼠睾丸器官培养模型。

　　方法：利用旋转通气培养法在体外培养睾丸，优化培养条件，并与Transwell小室培养法进行形态学比较。HE染色观察睾丸组织结构的变化，BrdU染色法观察睾丸在体外的细胞增殖，放射免疫法观察体外培养睾丸的睾酮分泌能力，免疫组化法观察睾丸中功能蛋白的表达。

　　结果：通过培养结局的对比，旋转通气培养法培养的睾丸组织形态更完整。睾丸大小以0.3~0.8 mm3为宜。各组精原细胞增殖指数呈上升趋势，Sertoli细胞增殖指数呈下降趋势：3 d组精原细胞增殖指数的增加与1 d组相比有统计学差异（P<0.05），5 d组Sertoli细胞增殖指数的减小与1 d组相比有统计学差异（P<0.05）。睾酮分泌量随培养天数的增加而减少且差异均有统计学意义（P<0.05）。培养3 d后，Leydig细胞胞浆内可见3β-羟基类固醇脱氢酶（3β-HSD）、细胞色素P450 17α羟化酶（P450c17）、胆固醇侧链裂解酶（P450Scc）蛋白的表达，Sertoli细胞胞浆内可见波形蛋白（Vimentin）表达。

　　结论：利用旋转通气培养法成功建立睾丸器官体外培养的模型。