动物实验,新冠病毒 中国实验动物信息网 2020-11-25 488

　　近期，有媒体报道新冠病毒感染者出院后再次检测呈阳性，不得不返回医院进行观察。这引发了公众对康复期患者是否有 “复发” 或“再次感染”的风险的关注。中国医学科学院医学实验动物研究所秦川课题组在预印本网站 bioRxiv 上发表论文称，研究发现新冠病毒感染过的恒河猴不会发生再次感染。这对疾病预后和疫苗设计具有重要意义。

　　在这项新研究中，研究组使用新冠病毒感染过的非人灵长类动物模型，进行相同的病毒攻击，以确定再次感染的可能性。

　　恒河猴初次感染分析

　　研究组采用一定量的新冠病毒毒株经气管对 4 只成年中国恒河猴进行感染。初次感染后，3 只猴子的体重减轻了 200～400 克，但均未观察到直肠温度变化，其他临床症状如食欲下降、呼吸频率增加和驼背姿势等较为短暂。鼻咽拭子和肛拭子中的病毒载量在感染后第 3 天达到*高水平，然后自然下降。

　　为了确定新冠病毒感染猴子的病毒分布和组织病理学变化，研究组在感染后第 7 天将 1 号猴安乐死并进行尸检，结果在鼻、咽、肺、肠、脊髓、心脏、骨骼肌和膀胱中均发现病毒复制。经 HE 染色和 SARS-CoV-2 抗刺突蛋白染色证实，病变主要发生在肺部，为轻至中度间质性肺炎，主要特征为肺泡间隔增厚、肺泡中的肺泡巨噬细胞聚集、肺泡变性、肺泡上皮细胞和炎性细胞浸润。

　　此外，感染第 7 天的胸部 X 线片显示右肺上叶具有不同程度的局部浸润和间质标记，显示轻度至双侧磨玻璃样混浊。

　　与感染第 3 天和第 7 天相比，2、3、4 号猴的新冠病毒特异性抗体在感染后第 14 天、第 21 天和第 28 天均显著升高。3 只活着的猴子在感染第 28 天，体重和直肠温度相对稳定，鼻咽和肛门拭子中均未检测到新冠病毒，胸部 X 光检查未发现明显异常。

　　上述数据表明这 3 只猴子已从新冠病毒感染中康复，并相似符合临床出院评估标准（无临床症状和放射学异常以及两项 RT-PCR 阴性结果）。

　　恒河猴再暴露分析

　　随后，研究组对 3 号猴和 4 号猴用相同剂量的新冠病毒毒株再次进行气管内感染，未暴露的 2 号猴作为对照。

　　再暴露后，两只猴子的体重未减轻，体温均短暂升高，但鼻咽和肛门拭子中病毒检测为阴性。再感染后第 5 天对 3 号猴子实施安乐死并进行尸检，与初次感染第 7 天的 1 号猴子相比，3 号猴子的所有组织中均未发现病毒复制，肺组织中亦未发现病理损伤和病毒抗原。胸部 X 线片显示 4 号猴子在再感染后第 5 天没有异常。

　　研究结果表明，新冠病毒感染后康复的猴子不会被再次感染，亦不会复发。

　　研究意义

　　据报道，高水平的中和抗体对 SARS-CoV 感染有保护作用，而低水平的中和抗体则更容易增强 SARS-CoV 感染并触发抗体依赖性感染增强作用（ADE）。

　　该研究中，在二次暴露新冠病毒的康复猴子中未发现 ADE。由于该研究的动物实验中得到的中和抗体与康复患者中得到的中和抗体具有可比性，所以这一发现对评估疫苗开发具有重要意义。

　　研究还发现，如果猴子在初次感染后的早期产生中和抗体，则不会发生再感染。相应的，正在康复的患者只要建立起足够的特异性抗体以增强对新冠病毒的免疫力，就不会具有传染性。

　　另一方面，在再暴露的猴子所有主要组织中均未检测到病毒复制，这表明新冠病毒可能不会长时间潜伏。对于出院患者检测复阳的现象，这可能归因于出院前的 RT-PCR 测试 “假阴性” 结果，或者患者符合出院标准却未完全康复，而非再次感染引起。因此，对下呼吸道的诊断技术、抗体监测和样本检测的进一步完善对于治疗新冠病毒感染至关重要。