CRISPR/Cas9 中国实验动物信息网 2020-10-20 387

　　近年来，基因组编辑工具已经广泛使用，并且簇状，规则间隔的短间隔回文重复（CRISPR）技术引起了基因组编辑的激增。 CRISPR是细菌DNA中的天然序列，可与CRISPR相关（Cas）核酸酶协同作用，诱导RNA并保护细菌基因组免受侵入性噬菌体中检测到的特定靶序列的影响。

　　*近，已经对使用该系统的高序列特异性来治疗动物模型中的遗传疾病并从患病患者制备无病干细胞的原始理论进行了研究。 CRISPR也可以用于制备具有特定基因突变的小鼠模型。与现有方法相比，这使您可以在更短的时间内达到研究目标。据报道，2014年初，CRISPR-Cas系统被成功用作在人类细胞中进行高效且高度特异性的全基因组筛选的工具。因此，它为寻找与人类健康和疾病相关的遗传功能开辟了无限的可能性。

　　例如，2月5日，军事医学科学院放射放射研究所的研究人员在《自然》杂志的《基因疗法》杂志上发表了一项新研究，研究了靶向HBV抗原（HBsAg）的编码。 CRISPR/CRISPR相关Cas9系统对细胞培养系统和活体动物区域的影响。结果表明，CRISPR/Cas9在体内外均可抑制HBV复制和表达，这可能是HBV感染的一种新的治疗策略。 3月12日，美国Salk生物研究所的研究人员首次发现，一种将X-link SCID患者的细胞转化为干细胞样状态，修复基因突变并促进实验室细胞修复的方法。我发现。K细胞的成功生产为这种罕见疾病的治疗提供了希望。扩展阅读：自然：我的科学家使用CRISPR破坏了乙型肝炎病毒；基因组编辑给罕见疾病带来了希望。

　　4月9日，云南省灵长类动物生物医学重点研究所的国际期刊《人类分子遗传学》，中国科学院遗传与发育生物学研究所，昆明科技大学，埃默里大学医学院。 》发表了一篇题为“使用CRISPR/Cas9破坏恒河猴Distrofingen的功能”的研究论文。在这项研究中，CRISPR/Cas9系统被用于功能上破坏猕猴肌营养不良蛋白基因。

　　本文的相应作者是云南省灵长类生物医学科学研究所主任纪维志，以及中国科学院遗传发展生物学研究所研究员李晓江博士。季维志博士曾任中国科学院昆明研究室副主任，主任，副主任。我是生殖生物学研究所的所长。生物学/生殖发育生物学研究。 2013年，由云南省中国分公司牵头的云南省灵长类生物医学重点研究所利用世界*新的基因组编辑技术CRISPR/Cas9和TALEN对两种鲭鱼和蟹猴进行了有针对性的基因修饰。做到了11月，我们获得了全球首批两只具有CRISPR/Cas9基因靶点修饰和TALENs基因靶点修饰的猴子，并将我们的研究结果发表在Cell和CellStemCell上，引起了世界科学界和媒体的广泛关注。我是。

　　的相关信息他从事遗传性神经退行性疾病，细胞内转运和早期神经系统发育的病理机制研究，其发现已发表多次。适用于PNAS，CellRes，HumMolGenet，Neuron，JCB，Brain，JBC和其他国际知名期刊。 CRISPR/Cas9已被用于遗传修饰包括灵长类在内的各种物种的基因组。不幸的是，这项新技术产生了镶嵌突变。此类突变是否在功能上破坏了靶基因或导致了人类疾病中的病理迹象尚待观察。使用CRISPR/Cas9创建人类疾病的大型动物模型时，需要解决这些问题。

　　在这项研究中，研究人员使用CRISPR/Cas9靶向猕猴中的肌营养不良蛋白基因，以产生杜兴氏肌营养不良症（DMD，一种与X连锁的隐性肌肉营养不良症）。突变。相对靶向率的检测表明，CRISPR/Cas9靶向可导致藻类猴肌肉中多达87％的肌营养不良蛋白基因发生嵌合突变。

　　此外，CRISPR/Cas9可以诱导雄性和雌性猕猴的突变，并在早期DMD中发现营养不良的肌营养不良蛋白和肌肉变性。这些发现表明，无论基因模型如何，CRISPR/Cas9都能有效地制备人类疾病的猴子模型。新生儿Cas9靶向红蜥蜴中退化的肌肉细胞，表明该疾病的早期干预和治疗可以有效减轻肌病。