耳聋动物模型 中国实验动物信息网 2020-10-15 401

　　小型猪和人类之间的物种差异很小，在器官结构和代谢方面它们与人类相对接近，许多疾病与人类有着共同的病因，它是研究各种人类疾病的理想动物模型。在听力方面，微型猪的内耳结构和听力在胚胎后期已经成熟，因此与其他啮齿动物和新西兰兔相比，微型猪在建立人类听力损失的动物模型方面无与伦比。没有优势。可以进行用于听力丧失的干细胞疗法，各种内耳疾病的建模以及听觉电生理实验。耳蜗的血管纹状体的螺旋神经节，螺旋边缘，毛细胞和边缘细胞表达Na + -K + -ATPase，并且表现出内部淋巴和周围淋巴的离子梯度以及每个细胞的稳定功能。它在维护中起着重要作用。瓦巴因G（Ouabain）是Na + -K + -ATPase的有效抑制剂，与Na + -K + -ATPase的α亚基结合时，抑制Na +和K +酶的转运功能。有可能。它增加细胞中的Na +浓度，抑制Na + -Ca 2 +交换，并增加细胞内Ca 2 +浓度以产生积极的肌肉力量（以增强心脏）。哇巴因会在小型猪的内耳造成螺旋神经节神经元（SGN）损伤，损伤的效果取决于浓度和时间。毛细胞没有明显的损伤。张学茹等。使用Toxicin G建立了小型猪的听力损失模型。

　　（IVN）迷路手术切除后的听神经（AN）包括前庭下神经，前庭上神经（SVN），耳蜗神经（CN），面神经（FN）; B。隐窝及其征象：第8和第9第二颅神经和脉络丛; C.通过迷宫模拟ABI移植; D. CI模拟实验； E。耳蜗刺激电极； F。 SCARA鼓膜窗口用于模拟通过微丝（MF）进行的内部耳部药物输送。硬膜：髓膜，CP：脉络丛，BT：脑组织，SE：刺激电极，C：耳蜗，RW：圆形窗口，OW：椭圆形窗口，E：髓膜

　　1、实验方法用Smiancin（0.2 ml/kg）和2％戊戊比妥钠（1 ml/kg）肌肉内麻醉贵州小型猪，将其置于左卧位，右耳，脸颊和颈后部分。准备皮肤，消毒，然后铺开手术巾。严格按照无菌手术的要求执行所有手术程序。沿下颌的后缘切一个纵向切口，距耳朵的边缘1厘米，距上颌的角度1-2厘米。切口的长度约为4-5厘米。它直截了当地分开皮下和肌肉组织，露出茎并去除附着的肌腱。 ，从根部去除茎杆，露出乳白色突起。用电钻向内研磨乳突，然后将其返回到中耳腔，露出耳蜗回和圆窗小生境。根据实验组，将200 L的vabein溶液或常规生理盐水明胶海绵放在圆形窗口中放置30分钟。然后使用负压抽吸器抽吸手术腔中的流体，一层又一层地缝合组织并关闭手术腔和皮肤切口。手术后，连续7天每天肌内注射160万单位的青霉素，以防止术后感染。在手术前，手术后3天，手术后1周和手术后2周进行动物耳朵的听力测试。用smenoxin（0.2 ml/kg）和2％戊巴比妥钠（1 ml/kg）肌肉内麻醉动物。在动物进行深度麻醉之后（稳定的呼吸，大约55-60次/分钟的心率，自发的肌肉活动，角膜反射出现），俯卧，使头部居中固定你的四肢。我们使用

　　TDT来确定动物的ABR听力阈值。记录电极插入在耳朵的前边缘与骨表面之间的连接线的中点，参考电极皮下插入测试耳朵的耳道，接地电极插入鼻子的尖端。使用“点击短一只耳朵”刺激，持续时间为100毫秒，刺激频率为21.1/s，收集的信号叠加1024次。内置耳道的耳机会发出声音，低通滤波器为50Hz，高通滤波器为3000Hz，刺激强度从90dB开始，以5dB的增量逐渐减小，直到V波消失，并记录ABR阈值。测听设备的*大声音强度为90 dB，因此，如果无法在全部90 dB处得出ABR波形，则认为动物的听觉阈值为100 dB。 Sig-Gen系统记录双耳的听力阈值。

　　2、 Vaavein溶液对螺旋神经节的影响与正常对照组相比，1 mM组的上，中和下陀螺螺旋神经节细胞在术后3、1、2周均明显减少。 ..两周后，与手术后第3天的同一组相比，壁回的神经节细胞的损伤增加。然而，与正常对照组相比，在0.1 mM组的术后3天和1周，上，中回旋状神经节的数量没有明显减少，而下回旋状神经节的数量却没有明显减少。淋巴结细胞数量减少。在0.1 mM组的手术后两周，与正常对照组相比，上，中和下回旋中的螺旋神经节细胞数量减少，而上，中和下回旋的旋转较术后3天减少。螺旋神经节细胞减少。缩减。

　　3、 Uavein溶液对ABR的作用与常规对照组相比，在使用vabein药物作用后，ABRV波阈值在术后3天，术后1周和术后2周升高。术后3天，1周和2周，ABRV波阈值在1 mM组和0.1 mM组较高。与手术前相比，正常对照组和生理盐水对照组在术后2周的听力没有明显变化。正常对照组的术前听觉与术后听觉无明显差异。在每个术后期间，与正常对照组和生理盐水正常组相比，1 mM组的ABRV波阈值明显更高。术后3天，术后1周和术后2周，0.1 mM组的ABRV波阈值高于正常对照组和生理盐水组。术后1和2周，1 mM组的ABRV波阈值显着高于0.1 mM组。