表皮细胞提取,新生鼠处死 中国实验动物信息网 2020-10-14 1425

　　方法一

　　一般用酒精擦拭全身以后，直接用剪刀断头处死，滴尽体内血，用棉球擦干净颈部血，然后大头针固定就好了，不到一分钟就行了，而且不会影响细胞的活力，也没有应激反应。

　　方法二

　　既然是要分离细胞要注意无菌操作

　　1、对乳鼠进行消毒：将乳鼠浸泡在75%的酒精中片刻，或用酒精擦拭乳鼠全身。

　　2、处死和放血：用无菌剪刀剪乳鼠的左腋下（相当于心脏的位置）彻底放血。

　　3、取材：取的表皮组织置无菌生理盐水或PBS液中清洗，再进行分细胞的处理。

　　方法三

　　1、将乳鼠浸泡在75%的酒精中浸泡5分钟。（基本上喝酒都喝晕了，还顺便消毒）

　　2、再新洁尔灭浸泡5分钟（乳鼠已经挂了，再次消毒）。

　　3、捞出来，从颈部做一切口，尾部及四肢一切口，腹部一切口（注意不要切开腹膜），然后一拉皮就下来了。取表皮干细胞就是这么取的，仅供参考！

　　方法四

　　1）、将表皮再次以0.25%胰酶37度下振荡消化8min左右，加入与胰酶等量的含10% FBS的培养基终止消化后，充分吹打。

　　2）、1000rpm/min离心10分钟，弃去上清液及已消化的表皮。

　　3）、加入ESCs培养基，充分吹打，制成单细胞悬液。