动物实验,大鼠模型 中国实验动物信息网 2023-08-01 1434

　　1.实验目的

　　（1）熟悉建立吗啡依赖性大鼠模型的方法，并复制吗啡依赖性大鼠模型。

　　（2）观察吗啡依赖大鼠的戒断症状并对其评分，以确定是否成功建立了吗啡依赖大鼠模型。

　　2.实验材料和方法

　　（1）实验材料

　　1.所需设备

　　（1）带盖的玻璃标本圆筒（高度45厘米或以上，直径30厘米）：观察大鼠的退缩使用症状。

　　（2）在标准电子天平上称量老鼠。

　　（3）鼠笼及相关设施（包括饮用水，饲料和寝具）

　　2.所需试剂

　　（1）盐酸吗啡注射液：1毫升规格为10毫克x 10片/盒，批号是H21022436、存放在室温下。

　　（2）盐酸吗啡（可注射成毒剂），《学校毒药管理条例》，包括事先批准使用计划，购买，双锁双重安全管理的每日管理和使用时间并严格遵守法规

　　（3）0.9％氯化钠注射液：500ml /瓶，批号为H20056626、存放在室温下。

　　（4）盐酸纳洛酮注射液：规格为1ml x 5片/盒，0.4mg，批号为H20055758。存放在室温下。

　　3.制备试剂没有特殊的试剂制备要求。

　　（II）实验专用的方法和操作步骤

　　1.实验动物：40只健康SD大鼠，体重（260±20）g，由昆明医科大学实验动物科学学院实验动物中心提供男一半，一半服役。按照随机分组的原则，将它们分为空白对照组和吗啡依赖性组。此外，吗啡依赖性组分为四个亚组：1周吗啡依赖性组，2周吗啡依赖性组，4周吗啡依赖性组和8周吗啡依赖性组。换句话说，将实验大鼠分成5组，每组8只，分别放在单独的笼子里，可以自由进食和饮水。观察并记录他们的活动，食物摄入，水消耗，大便等。 2.实验方法吗啡依赖性组的大鼠每天连续三天（8：00、12：00、16：00）皮下注射盐酸吗啡，连续5天。每次注射的剂量在第1天为5 mg/kg，在第2天为10 mg/kg，在第3天为20 mg/kg，在第4天为40 mg/kg，在第5天为50 mg/kg。是。每次注射前，要彻底消毒，用一次性注射器注射，每天对动物称重一次。空白对照组注射相同剂量的盐水。每组第6天随机选择四组吗啡依赖性大鼠。两只大鼠在吗啡注射前2小时皮下注射盐酸纳洛酮5 mg/kg，以促进诱发退缩症状的实验，并置于玻璃标本罐中观察退缩症状。然后，给定分数，对空对照组给予相同的治疗和给定的分数。

　　ine确认吗啡成瘾后，每天进行1周吗啡成瘾组，2周吗啡成瘾组，4周吗啡成瘾组和8周吗啡成瘾组每天一次每周两次向背部皮下注射30 mg/kg盐酸吗啡。在吗啡依赖性大鼠模型的四个不同时期中分别建立了四个，四个和八个星期。

　　无数的症状包括下垂，流涎和腹泻。在观察过程中，每2分钟评估一次上睑下垂，并根据严重程度对其他不可计数的症状进行评分。无症状评分为0分，轻度为1分，重度为2分。总戒断分数是通过对症状求和而得出的。在接触过程中所有大鼠大喊2点。所有症状评分的总和是总退出评分。

　　（3）实验操作的每个步骤的注意事项 （1）在大鼠吗啡注射实验的*阶段的第5天，尤其是在第3天（注射剂量为10 mg /从公斤增加）。*高20mg/kg），并在第4天（将注射剂量从20mg/kg增加到40mg/kg）。由于剂量的急剧变化，一些动物可能由于不耐受药物而死亡。需要仔细观察以降低动物死亡率。

　　（2）注射时要注意无菌操作。在注射到大鼠背侧皮肤之前，要缩短头发，露出皮肤，用75％的医用酒精对皮肤进行灭菌，并使用1 ml一次性注射器进行注射。

　　（3）每次使用玻璃瓶观察戒断症状时，都需要用75％的医用酒精仔细擦拭，观察另一只动物。目的是清洁和去除异味，并避免干扰后续实验大鼠中的先前实验大鼠。

　　3.实验结果

　　观察并记录两组大鼠的戒断症状。吗啡依赖组大鼠有明显的戒断症状，其发生次数明显高于对照组。 t检验后，两组之间存在显着差异（P\u003c0.05或P\u003c0.01），这是基于证明吗啡成功建立的大鼠模型所致。观察到的戒断症状无数（像狗一样颤抖，伸展，毛皮清洁，吞咽，站立，跳跃，牙齿震颤）和无数症状（下垂，唾液）。分泌物，腹泻等） Maldonade等。根据方法和评分标准记录评分，记录观察期内出现的可数症状数量，并根据退出评分标准对评分进行评分。

　　四个结果的分析

　　每日递增，皮下注射盐酸吗啡注射液，盐酸纳洛酮注射液诱发戒断症状，给戒断症状评分，对照组和依从组成功建立了吗啡依赖性大鼠模型。这种方法的优点是操作简单，动物死亡率低，对戒断症状的直观观察以及评分标准的可操作性强，是建立吗啡依赖性大鼠模型的绝佳方法..

　　5.经验和经验

　　（1）本实验是基于观察实验大鼠无数戒断症状和无数戒断症状，并比较评分结果。建立成功。

　　（2）实验期间有两个问题需要特别注意。一种是上述实验第3天和第4天注射剂量的大变化，需要密切注意和观察以降低动物死亡率。请注意，戒断症状由不属于研究组的训练有素的人员评分。避免主观因素的干扰。