动物实验,斑马鱼sat1.a 中国实验动物信息网 2020-09-29 1438

　　目的：在先前的研究中，我们筛选了一批通过Tol2转座子介导的插入突变表达绿色荧光蛋白GFP的组织特异性斑马鱼菌株。其中一种菌株Tol2：20141221t在神经系统中表达GFP，但尚未确定Tol2转座子在基因组中的插入位置以及触发了哪个基因突变。本文的主要研究目标是鉴定由Tol2转座子插入诱导的斑马鱼变体。

　　方法：使用热不对称界面PCR（TAIL-PCR）定位Tol2转座子插入的基因组。原位杂交用于检测突变基因的时空表达是否与菌株的GFP表达匹配。筛选和鉴定纯合变异体，并进一步分析由遗传突变引起的发育缺陷。

　　结果：在该菌株中，将Tol2转座子插入到亚精胺/精子N1-乙酰基转移酶1a（亚精胺/精子N1-乙酰基转移酶1a，sat1.a）的第8个内含子区域中，产生sat1.a基因的转录过早终止。筛选了sat1.a的纯合变异体，但未检测到明显的发育障碍。

　　结论：经筛选和鉴定的Tol2转座子介导的斑马鱼sat1.variant没有明显的发育缺陷，但可以用作研究神经系统发育的有力工具。