动物造模,长爪沙鼠CST3序列 中国实验动物信息网 2020-09-25 458

　　目的：分析长爪沙鼠胱抑素C（CST3）的cDNA序列同源性，建立CST3蛋白的原核表达系统，为蒙古贻贝中CST3抗体的制备及后续的遗传功能研究奠定基础。蛇Cst3 cDNA序列的克隆，同源性分析.

　　方法:将优化的序列消化并连接到pET28a载体中，以完成重组CST3蛋白表达载体的构建。将载体转化到感受态细胞中，通过异丙基β-D-硫代半乳糖苷（IPTG），SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）和Western blotting（Western）诱导CST3蛋白的原核表达通过（验证）验证。

　　结果：小鼠Cst3基因与人和小鼠Cst3基因具有低序列同源性。将蛇的经密码子优化的Cst3表达序列插入pET28a质粒中以获得CST3蛋白表达载体。在37°C下用1 mmol/LIPTG诱导12小时可产生大量CST3蛋白。

　　结论：长爪沙鼠CST3蛋白的体外表达系统已成功构建。