动物实验,间充质干细胞 中国实验动物信息网 2020-09-14 580

　　目的：探讨间充质干细胞（MSC）分泌的外泌体（Exos）是否通过miR-21-5p调节心脏自噬并影响心肌缺血大鼠的心脏功能。 

　　方法：观察MSCs-Exos对H2C2s的H2O2刺激的体外作用；通过CCK-8分析检测细胞活力；通过流式细胞术检测细胞凋亡；通过荧光显微镜观察细胞内检测活性氧（ROS）的产生；自噬相关蛋白和荧光GFP-LC3的蛋白质印迹分析，以确定自噬体的形成。在大鼠MI/RI模型中，通过TUNEL测量，免疫组织化学染色和超声心动图检查MSCs-Exos对细胞凋亡，心肌LC3B表达和心脏功能的影响。在体外实验中，MSCs-Exos显着提高了H2O2刺激的H9C2细胞的活力（P\u003c0.05），并降低了ROS的产生和凋亡（P\u003c0）。 .05）。与H2O2 + MSCs-Exos组相比，H2O2 + MSC-ExossimiR-21-5p组的细胞活力显着降低（P\u003c0.01），并且ROS的产生和凋亡率显着提高。我做到了（P\u003c0.01）。 Western blot检测显着增加了H2O2 + MSCs-Exos组中LC3B-II/LC3B-I和LC3B-II的表达（P\u003c0.01），与H2O2组相比，p62的表达显着增加。发现减少了（P\u003c0.01）。与+ MSCs-Exos组相比，H2O2 + MSC-Exossimi-21-5p组中的LC3B-II/LC3B-I和LC3B-II表达显着降低（P\u003c0.05），而p62的表达则显着降低。明显增加（P\u003c0.05）。

　　结果：与H2O2组相比，H2O2 + MSCs-Exos组中的GFP-LC3点数量增加；与H2O2 + MSCs-Exos组相比，H2O2 + MSC-ExossimiR-21-5p该组细胞中存在的GFP-LC3点的数量显着减少（P\u003c0.05）。在体内，RT-qPCR分析结果表明，MIC/RI后，MSCs-Exos和心肌组织中miR-21-5p的表达呈正相关。与其他组相比，MI/RI + MSCs-Exos组中的LC3B表达显着增加（P\u003c0.01），心肌细胞凋亡明显减少（P\u003c0.01）。 ）；缩短率（FS％）和左室射血分数（LVEF）均得到明显改善（P\u003c0.05）。

　　结论：MSCs-Exos可以通过调节心肌自噬来改善MI/RI大鼠的心脏功能，其机制可能与miR-21-5p转移有关。