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中洪博元在动物造模时如何配制试剂?

  很多和中洪博元合作动物造模的朋友会问,造模时你们是怎么配制试剂的?

      首先,让我们根据储存条件划分动物实验中需要使用的试剂类型。一些试剂可以使用,而其他则需要准备。

  前者等:更稳定或单剂量包装的试剂。 Western DAB彩色试剂易于获得,可以直接使用。后者,例如:大多数药物和试剂。当然,其中大多数都需要准备。

  根据其用途分类,可以分类如下。 药物:通常研究化合物功效或机理的化合物或中草药提取物。它可以分为原料和制备。该API通常直接可用。有些制剂需要提取,有些可以直接使用。

  动物模型试剂:STZ用于糖尿病,半乳糖胺,四氯化碳对肝脏的损害,镉对睾丸的损害,博来霉素对肺的损害,腺嘌呤对肾脏的损害,角叉菜胶引起的炎症

  动物模型的饲料:通常这是固态。有些是半固体的。液体状态低。例如,高脂饮食应与胆固醇,丙硫尿嘧啶,胆酸盐,蛋黄,猪油等混合。

  动物基本操作试剂:例如麻醉剂,动物脱毛剂,硫化钠,动物标记剂***,用于采血或插管的肝素试剂,用于消毒的75%乙醇,碘伏,异丙嗪,动物术后抗生素

  各种缓冲液或基本分散介质:例如PBS,盐水,柠檬酸盐缓冲液,克里希纳溶液,Ren溶液,0.5%CMC-Na溶液,DMSO溶液,增加溶剂泊洛沙姆(与药物混合,然后添加到溶剂中)

  用于存储标本的试剂:例如10%福尔马林,中性福尔马林,4%多聚甲醛,布氏溶液等。

  清洁溶液:例如稀盐酸溶液,重铬酸钾洗剂。

  检测试剂:随实验而异。每个实验有不同的方法。您可以打开另一个特别讨论。

  根据其使用时间限制进行划分。

  是一种即用型。例如:STZ非常易于拆卸,准备后应立即用完。否则,它将被完全禁用。制备后应尽快用完一些酶试剂。准备充分的开发人员通常会在很短的时间内用完。对水不稳定的药物,例如青霉素。请尽快用完。

  可以在一周内使用短片。主要是一些亚稳态解决方案。它在温度和氧气的作用下会缓慢分解,不能满足使用要求。例如,蛋白质电泳中的过硫酸铵是一种辅助试剂,可促进氧自由基的形成并促进凝胶的形成。自由基不会长时间产生,因此通常使用1至2周。在冷冻保存下,某些缓冲液会尽快耗尽,尤其是在体外实验中。否则,可能会影响实验结果。

  1个月内为中等效率型:如果制备后在低温下保存,许多试剂可以使用1个月或更长时间。

  长效3个月以上:许多具有稳定性能和低浓度精度要求的溶液可以长期保存。盐水和CMC-Na溶液以及福尔马林。

  根据其纯度可以分类如下。

  化学纯度:用于少量杂质的普通化学实验中。纯度通常应超过98%。分析纯度:在痕量杂质的分析实验中,纯度超过99%。缩写:AR

  色谱纯度:液相流动相的要求。据我了解,应该没有杂质峰。纯度可以为99.9%。

  生物化学纯度:似乎写在一些生物化学试剂上。缩写:BR

  请注意,某些制造商标记纯(GR)等级。实际上,这可以等同于分析纯度。

  是*高级别:标准产品,参考产品。实际上,两者之间没有太大区别。通常,这两个词一起使用。根据药典,我们通常使用的参考物质称为参考物质。抗生素基准物质(注意它们不是合成的抗菌剂)被称为标准物质。实际上,我们似乎总是将“标准产品”视为*高级别,将“参考产品”视为低于“标准产品”。事实并非如此,两个词必须相同。仅标准产品特别提及抗生素或其他生物产品。这导致

  区分两者:

  参考物质,参考物质是指用于识别,检查和含量确定的参考物质。其中,标准物质是指用于测量生物测定法,抗生素和生化试剂的含量和效价的参比物质,以滴定度单位计算并以国际标准进行校准。例如:青霉素参考物质称为标准品,氧氟沙星参考物质称为参考物质。但是,在已发表的论文中,我们看到的大多数情况是两者的混合。有些人将青霉素作为参考和标准。

  那么这些基准物质有哪些要求?我认为纯度必须为99.99%或更高。并非所有生物制剂或抗生素都是如此,因为某些抗生素实际上是混合物。只能通过功效评估。

  在准备标准产品或参考产品时,请特别注意准确性。当称量少于10毫克的物质时,通常很难准确。因此,在制备试剂时,可以通过增加10 mg或更大重量的浓度并逐步稀释来提高准确性。

  每种试剂对于不同的含量都有不同的规定和要求。您会看到纸上显示

  试剂纯度。通常写有关化学纯度,分析纯度,色谱纯度和纯度的文章。包括几个标记?等等这需要在进行实验之前了解所用试剂的纯度要求。否则很难获得满意的结果。例如,如果色谱法要求您使用纯试剂和分析试剂,则实验结果可能会失败。

  动物实验使用的分析级以上。进行药代动力学实验时,请注意液相检测并使用色谱试剂。否则会严重影响您的实验结果。根据毒性,有几种无毒,低毒,成瘾和高毒类型。

  实验过程中请小心存储和保护有毒试剂。

  接下来,让我们谈谈试剂材料的存储。

  这里提到的存储方法是直到使用供应商提供的试剂之前的存储方法。以前,很多人没有对此问题给予过多关注。但这是一个重要的问题。否则,实验尚未开始,试剂失败,应暂时更换。或者,在实验过程中,试剂可能突然变得不可用,并且整个实验可能会失败。因此,非常有必要进行这项初步工作。

  根据状态,有固体,液体和半固体。固体相对容易储存。应特别注意液体和半固体。

  大多数试剂是固体。一些固体是晶体,晶体以多种形式出现,包括针状,柱状和小晶体。有些是颗粒状的,有些则是颠簸的。其中,针状晶体和柱状晶体具有良好的流动性,并且片状和块状不是很好。将来在配制试剂时会对称重产生一定的影响。这类物质的储存是密封的。如有必要,请严格存放。

  有一种易于吸收水的固体类型。像氯化钙或氯化锌。要特别注意相对湿度的影响。

  根据其存储要求有几种类型:室温存储,低温冷冻,正常冷冻,低温冷冻和深度冷冻(小于-70度)。

  室温下储存的试剂原料可以放在实验室中储存试剂的柜子中。通常,避免光照并避免过热。通常,请在35度以上小心。另外,应注意,需要分离不同等级的试剂。 ..请分开那些容易吸收的和那些难以吸收的。将其放在明显且易于访问的位置。在某些条件下可能爆炸的危险和有毒试剂物质要分开存放。

  低温冻结有两点需要注意。首先,不要冷冻冷冻食品。一般来说,制冷不会冻结,因为温度通常在0到4度之间。当然,这是指部分包含水的试剂材料。第二个问题是普通制冷试剂的原料太稳定,但不能冷冻,因为它们会损失或降低某些类别物质的活性,因此通常应尽快使用有。

  正常冻结通常意味着放置在0度。低温冷冻通常是指在-20度下储存。这两种存储方法通常适用于某些在室温下不稳定的酶。请勿松散关闭冰箱或在短时间内反复打开冰箱。试剂材料可能会失活。此外,在对流浆箱除冰之前,有必要在相同条件下将其移至相应的临时存储中。

  深冷库通常适合需要长时间保持活性的物质。对于试剂原料,通常很少见。这是因为试剂原料的固体成分占据*多。固体的一般分解相对较慢。在存储实验标本时更常使用它。根据毒性,有几种无毒,低毒,成瘾和高毒类型。因此,有必要在使用和存放过程中注意保护。

  对于有毒原料,首先要做的是了解并了解其毒性机理。有些可能令人沮丧,例如发红,燃烧和其他不良反应。有些会引起血液毒性,例如苯会影响粒细胞。一些是神经毒性的,例如丙烯酰胺单体。有些是致癌的,这是我们*关心的。实例:溴化乙锭EB,PMSF和苄基磺酰氟是常用的蛋白酶抑制剂,常用的麻醉型铀氧还具有特定的致癌活性。其次,我们需要知道如何保护。处理和准备时要小心。通常可以戴一次性手套。第三、不幸的是,您需要知道如果感染了这些成分该怎么办。只要能够早发现而不是在口腔中发现,所有物质基本上都可以自行加工和洗涤。示例:用大量水洗涤,正确选择洗涤剂,使用特殊效果物质进行衰减处理。第四、我们必须知道这些物质使用后如何处理。不要对社会造成严重污染。

  上面,我们描述了根据需要存储试剂原料的过程。接下来,我们将讨论包装试剂原料的一般感觉。

  如何知道我有试剂时是否有问题?您是否要注明包装是否损坏?是正规的制造商吗?是海外进口还是国内分包?形状符合我们的要求吗?运输过程中有什么特殊要求吗?规格是否符合要求?通常,有四种获取试剂材料的方法。一种是去试剂供应点购买或接收它。一些常用的试剂,某些学校或研究机构都设有试剂仓库,可以在完成相关步骤后将其收集起来。有些可以在试剂商店购买。这些可以直接看到包装徽标。其次,试剂销售人员将其送到门口。基本上,您可以正常运行它。第三是邮购。他们中的大多数都是快递发的。检查后请检查。如果您有任何问题,可以再次与您的供应商联系。四是别人的礼物。通常,我们会考虑到这一点,建议您检查原始包装上的标签。请注意,某些生化试剂尤其已经过期。

  请参阅试剂材料包装。因制造商,批号,规格,数量而异。来自不同制造商的试剂的效果可能有所不同。不同的批号也可能不同。规格也很重要。裁缝。不要浪费太多试剂。但是,多次采样会导致一定的损失,这比实际的损失要高一些。有时快递员会错过东西,也会错过它们,这也很麻烦。对于多层包装的试剂,请记住,较小的包装已足够。

  以上是有关试剂原料的建议,但在实验开始时请仔细考虑这些建议,并严格按照您的要求使用原料。第三、试剂的溶解度。

  这适用于大多数固体试剂。当它是液体试剂时,取决于它是否可以混合或分散在溶剂中。

  一般而言,试剂可分为两类:可溶的和不溶的。它可以分为两类:亲脂性和亲水性。

  让我们谈谈如何准备这些试剂。

  易溶:与大多数酸,碱和盐试剂一样,它易溶,通常是水溶性的。这些试剂中有许多是在双蒸馏水中制备的。

  难溶性:一些难溶性物质具有很高的脂溶性,可以与油混合。但是,有时无法使用油,但此时必须将其混合,因此必须添加悬浮剂或增溶剂或必须使用助溶剂。悬浮剂,例如:羧甲基纤维素钠(CMC-Na);增溶剂,例如:Poloxamer 188;助溶剂,例如:乙醇。有些拥有DMSO。 DMSO被称为通用溶剂。但是,请注意,在实际使用中,它可能引起药理作用并可能干扰实验结果。如果可能,请勿使用。

  在制备不溶物时,可以将其加热,搅拌或超声处理。请特别注意不要盲目加热。一种是加热时会迅速降解产生分解产物的物质,另一种是加热时变得无效的物质,例如酶或类似蛋白质的物质。某些物质的溶解度是众所周知的。当然,您会熟悉这种内容。但是,某些试剂是未知的。你怎么做呢有三种方法。一种是检查试剂包装上的说明。通常,您会发现一些上述信息。第二种是在线检查。在Google上找到的网页或论文。第三是尝试。您可以尝试少量。看一下溶解度。我曾经使用丙酸睾丸激素注射液,并想将其稀释,所以我用双蒸馏水进行了稀释。事实证明,它根本没有混合。当时,这是非常清楚且不可思议的,因为说明未指定所规定的溶剂。之后,用植物油稀释,效果良好。

  有时,我想我对化学的药理学了解更多,并且从结构的角度了解溶解度定律。但是,由于过度自信,通常会忽略一些例外情况。像盐酸小ber碱一样,它必须在结构上是水溶性的。但是,它实际上是不可溶的。想一想,伊卡瑞糖苷具有糖基基团。糖基非常极性并且总是可溶的,对吗?但是,它几乎不溶于水,但溶于乙醇和甲醇。因此,除了参考相关信息外,该物质的溶解度确实非常重要,还必须准备一些初步测试。值得注意的是

  乙醇是非常好的溶剂。通常将其与各种浓度的水混合,但在某些情况下可能会更令人满意。

  难溶性:一些难溶性物质具有很高的亲脂性,可以与油混合。但是,有时不能使用油,但此时必须将其混合,并且必须添加悬浮剂或增溶剂或必须使用助溶剂。悬浮剂,例如:羧甲基纤维素钠(CMC-Na),增溶剂,例如:Poloxamer 188,助溶剂,例如:乙醇。有些拥有DMSO。 DMSO被称为通用溶剂。但是,在实际使用中,请注意它可能会干扰药理作用或实验结果。如果可能,请勿使用。\r\n制备不溶物时,可以将其加热,搅拌或超声处理。特别注意不要过热。一种是加热时会迅速分解产生分解产物的物质,另一种是加热时会失去作用的物质,例如酶和蛋白质类物质。某些物质的溶解度是众所周知的。当然,您会熟悉这种内容。但是,某些试剂是未知的。有三种方法可以做到这一点。一种是检查试剂包装上的说明。通常,您会发现一些上述信息。第二是在线检查。在Google上找到的网页或论文。第三是尝试。您可以尝试少量。看一下溶解度。我以前使用过丙酸睾丸激素注射液,所以我想将其稀释,所以用双倍蒸馏水将其稀释。您会看到它们根本没有混合。这是非常清楚和令人难以置信的,因为说明当时未指定规定的溶剂。之后,用植物油稀释,效果良好。\r\n有时候,我认为我从结构的角度对化学的药理学和溶解度定律了解得更多。但是,由于过于自信,通常会忽略某些例外情况。像盐酸小ber碱一样,它必须在结构上是水溶性的。但是,它实际上是不可溶的。请考虑一下。伊卡林糖苷具有糖基基团。糖基极性很高,会一直溶解,对吗?但是,它几乎不溶于水,但溶于乙醇和甲醇。因此,除了参考相关信息外,物质的溶解度当然非常重要,还需要准备一些初步测试。\r\n乙醇是非常好的溶剂。通常将其与不同浓度的水混合,但在某些情况下可能已足够。\r\n?第四、我们来谈谈通常用于制备试剂的溶剂或分散介质。

  必须说这是每个人都知道的问题。

  唯一常用的溶剂或分散介质是水,有机溶剂,复杂溶剂和缓冲剂。

  水是使用*广泛的溶剂。当然,自来水(至少是蒸馏水)不能用于制备试剂。*好使用双蒸馏水。双蒸馏水实际上等于注射用水。二次蒸馏水可以满足无菌要求,并且不含热原。制备水溶性试剂时,应注意清洁和消毒相关容器。请注意,您无法在高温下进行测量。变形会导致测量结果不准确。等等:量筒,量杯,量瓶。通常将这种玻璃容器浸入重铬酸溶液中,然后清洗。

  有机溶剂是许多试剂必不可少的。主要使用乙醇,甲醇,丙酮和氯仿。除了偶尔使用乙醇外,其余很少用作动物口服药物的溶剂。使用纯分析。当然,您必须使用色谱纯度进行液相检测。有时,这些溶剂无需任何准备,就可以用作试剂本身。等等:用甲醇沉淀蛋白质。执行PCR时,用氯仿除去蛋白质。请用乙醇洗涤。注意有机溶剂的可燃性和毒性。一种是防止由于操作不当而引起的火灾,另一种是采取某些防护措施,例如戴上口罩或一次性手套。注意甲醇对眼睛的毒性和氯仿的肝毒性。这些毒性远低于致癌物,但不能忽视。化合物溶剂通常是指高度亲水的溶剂,例如乙醇和水的混合物。也可以使用丙酮,但要谨慎使用。使用特定浓度的乙醇可以更好地制备某些试剂。如果要更准确地测量乙醇的浓度,*好使用酒精比重计。

  严格来说,缓冲液是分散介质,而不是溶剂。但是,它被广泛用于药理实验。这是因为某些试剂在某些pH条件下必须稳定。*常用的溶液是磷酸盐缓冲盐水(PBS)。 PBS也可以适应不同的pH值。还有,乙酸-乙酸钠缓冲液和柠檬酸盐缓冲液。上述STZ必须在pH 4到4.5之间稳定并且必须经过缓冲。同时,一些缓冲液是用于洗涤或临时存储组织的溶液系统。例如,在采集组织样本时,通常使用生理盐水或PBS清洁血迹。同样,与运行缓冲液一样,它也是蛋白质电泳和DNA电泳的基本介质。准备缓冲区时请注意以下几点:1、请严格遵守指示。主要添加到溶液中的物质的顺序。由于顺序错误,可能由于沉淀和其他现象而无法使用。二是准确测量PH值。第三是建立强大的标签。在准备蛋白质电泳缓冲液时,将浓缩的凝胶缓冲液和分离凝胶缓冲液颠倒一次,这会引起错误。两者是由于其成分比例不同而导致的pH值不同。明亮而有力的标签,易于识别。

  第五、我们来谈谈选择称量,测量和其他试剂制备设备。众所周知,试剂的大多数原料是固体,而有些则是液体。制备固体需要称重和测量设备,而制备液体材料则需要测量设备,其中一些需要称重设备。制备过程中还应使用玻璃棒,磁力搅拌器,PH试纸,分液漏斗,滤纸等设备,以使试剂适应您的要求。

  让我们谈谈这个问题。

  使用称重设备

  大多数试剂都是固体。将固体混入试剂时,通常使用计量设备。称重设备通常是天平。有狭窄且相对准确的钢厂,但它们在药房中使用。

  天平具有多种工作方式,包括常规的托盘天平,扭矩托盘天平,光电机械天平和电子天平。普通天平通常用于粗称重,每个人都已经习惯了。扭矩天平也易于使用,而光电分析天平则很少使用。以下重点介绍电子天平。

  余额具有多种精度,包括1g,0.1g,1/100g,1/1000g,1/10000g和1/100000g。这样,必须注意称量后的原料必须满足哪些要求并选择合适的精度。选择精确到0.1g至0.01g显然是不合适的。选择1/1000是可以接受的,但是使用1/10000是不必要的并且不合适。

  余额范围。每个余额都有一个范围。超过或接近*大范围是不合适的。当然,您的体重不能低于*小范围。使用前应先确认。

  余额调整级别。调整水平是一项使用天平之前必须完成的任务。主要前提是天平所在的房间必须控制温度和湿度,天平所在的桌子必须水平。请仔细阅读说明并进行调整。阅读和调整手册可以节省大量时间。液位计应直接位于天平的后面,并且视线应垂直于天平,请注意中央液位计的水泡。仔细耐心地进行调整。别太粗鲁关于使用

  余额的说明。除了对精度,范围和调整水平的上述理解之外,在称重过程中始终需要牢记一些注意事项。一种是提前插入电源几分钟,然后等到电子天平上的显示稳定后再称重。其次,除了在某些特殊情况下,通常将试剂材料横向添加。第三、权衡援助。称量纸通常可用于称量固体或容器;容器可用于称量液体。第四、称重并清理剩余的固体和意外溢出的液体。刷掉固体。可以用吸收纸干燥吸收液体,更换纸张并轻轻擦拭。

  对于固体,通常用小勺子将其研磨成粉末或小颗粒,然后用角勺在称量纸或容器上轻轻摇动。称量高度吸湿的固体,要特别注意环境的湿度并迅速称重。对于某些需要称量的液体,请使用滴管或移液器添加。一些固体是晶体,晶体以多种形式出现,包括针状,柱状和小晶体。有些是颗粒状的,有些则是颠簸的。其中,针状晶体和柱状晶体具有良好的流动性并且便于倾倒和称重。秤和颗粒应仔细称重。通常,倒入的试剂不会倒入原始瓶中。附加安装可能难以保证保质期。因此,在称量原材料时,请注意避免浪费。

  B测量仪器的使用

  主要测量仪器:刻度烧杯,刻度试管,刻度移液管,刻度杯,刻度量筒,刻度瓶,移液器,移液器*,微量进样器。

  前四个是相对粗略的量表,基本上是估计值。可以配制不需要精确浓度的试剂。

  量筒的规格不同。请根据您的情况选择。它可用于制备指定范围内的任何体积的溶液,并且是制备溶液的*常用方法。

  容量瓶更准确。但它无法匹配任何容量。它只有一些定量尺寸规格。等等:10ml,25ml,50ml,100ml等主要用于标准溶液的制备。有无色和棕色眼镜。

  移液器更准确。有很多规格。使用时,请用洗耳灯泡吸收,用手指调节音量并将其放下。这需要一些适应性训练。实践使完美。由于当今移液器*的广泛使用,有必要了解移液器在某些方面的优势。精通您可以提高实验效率。

  移液*是近年来在实验室中广泛使用的一种测量仪器。尤其是在某些痕量溶液的吸收中,它在某些必须严格避免污染的实验中起着不可替代的作用。使用移液器*时,请小心匹配*头部和*,并且在抽吸时请注意不要将液体吸入*。 *调整拨盘时请小心。不使用时,请调节至*大范围。在使用过程中必须定期校准。有进口产品和国内产品。进口质量更好。

  微型采样器也是一种精密测量仪器。它主要用于液相注射和蛋白质电泳注射。它具有在使用过程中或低于一定液位时可以插入设备的功能。有20ul,50ul和100ul范围。注意不要将长金属嘴向前弯曲,也不要阻塞不溶物。另外,请勿拉出活塞杆。使用后,用乙醇或蒸馏水洗涤,并放在专用盒中。

  不能在高温下烧制玻璃测量装置,以免容量不准确。仅吹干。移液*和微量注射器应根据说明进行维护。

  C使用其他工具

  使用烧杯通常,在准备试剂时使用烧杯。特别是对于需要加热的试剂,通常会添加一些溶剂(通常是水)以溶解一切,然后添加溶剂来弥补。注意烧杯的大小,并在加热时垫上石棉网。带有磁力搅拌器的搅拌棒尺寸合适,倾倒时不应泄漏。

  玻璃棒的使用玻璃棒主要用于搅拌,以使固体原料尽快溶解在液体中。确保玻璃棒不接触底部或墙壁,并且溶液完全旋转且没有死角。有人认为烧杯会立即融化并用玻璃棒搅拌,但实际上很容易破裂。此外,将温度计用作玻璃棒是非常不合适的。使用

  磁力搅拌器一是要注意适当的搅拌速度,搅拌棒应在溶液中有效旋转。二是要注意是否加热。没有加热,因为它是热不稳定的。

  漏斗的使用某些试剂在制备后需要过滤。添加液体时,请注意不要滴落滤纸的外部。确保滤出小的不溶物。使用

  PH试纸某些解决方案要求您调整PH值。 PH试纸可用于要求不高的解决方案中。注意试纸的PH范围。然后,一旦液体落在测试条上,就比较颜色。用玻璃棒浸泡。一项测试后,应清洁玻璃棒,然后再使用。使用

  PH计用PH计测量某些需要更精确pH值的溶液。注意保护电极。不使用时,请使用饱和氯化钾溶液保护电极。在这方面,有一本特殊的书可供参考。

  第六,我们来谈谈所制备试剂的使用和储存。

  在谈到存储原材料时已经提到了这个问题。但是,与原料相比,制得的试剂通常是液体或悬浮液,需要更仔细的存放。如前所述,此处不详细讨论保存。仅提及需要特别注意的地方。

  一种选择用于制备试剂的容器。通常,您会选择周围的所有可用容器。玻璃瓶更常用。较小的有青霉素瓶,也称为小瓶。 ** Doff型试管可以装满非常少量的试剂。较大的则有100ml,250ml和500ml范围的输液瓶。请根据需要使用。可以装蒸馏水的大瓶通常为1-5升,在某些情况下为10升。试剂可以包装在聚合材料制成的瓶子中。这种瓶子通常用于有毒试剂。用尽时可以将其丢弃。看起来有点舍不得像玻璃瓶。当您购买一些套件时,我们通常会提供其中一些瓶子。您可能想收集它们,但是在许多情况下它们很有用。

  使用其他工具\n使用烧杯通常,烧杯用于试剂制备。特别是对于需要加热的试剂,通常添加溶剂(通常是水)以溶解所有东西,然后添加溶剂以补充水分。注意烧杯的大小,并在加热时添加石棉网。带有磁力搅拌器的搅拌棒尺寸合适,倒入时不应泄漏。\r\n使用玻璃棒玻璃棒主要用于搅拌,因此固体原料会尽快溶解在液体中。确保玻璃棒未触及底部或墙壁,并且溶液已完全旋转且没有盲点。有些人认为烧杯会很快融化并用玻璃棒搅拌,但实际上它很容易破裂。此外,将温度计用作玻璃棒是非常不合适的。使用\n首先,磁力搅拌器必须注意适当的搅拌速度,并且搅拌棒必须在溶液中有效旋转。第二个要注意的是它是否被加热。没有加热,因为它是热不稳定的。\r\n漏斗的使用某些试剂在制备后需要过滤。添加液体时,请注意不要让其滴落到滤纸外面。确保滤出小的不溶物。\R\n某些解决方案可能需要调整PH值。 PH试纸可用于要求不高的解决方案中。注意试纸的pH范围。然后液体落到测试条上,并比较颜色。用玻璃棒浸泡。测试后,玻璃棒应在使用前清洗。使用\n PH计:使用pH计来测量某些需要更精确pH值的溶液。注意电极的保护。不使用时,请使用饱和氯化钾溶液保护电极。为此,有一本特殊的书可供参考。\r\n第六,我们来谈谈使用和存储准备好的试剂。\r\n在谈论原材料存储时提到了此问题。但是,与原料相比,制得的试剂通常是液体或悬浮液,需要更仔细的存放。如前所述,此处不详细讨论保存。只提及需要特别注意的地方。\r\n用于试剂制备的*佳容器。通常,您会选择所有可用的容器。玻璃瓶更常用。较小的是青霉素瓶,也称为小瓶。 ** Doff型试管可以装满非常少量的试剂。较大的是100毫升,250毫升和500毫升输液瓶。请根据需要使用。大瓶蒸馏水通常为1-5升,在某些情况下为10升。试剂可以包装在由聚合物材料制成的瓶子中。这种类型的瓶子通常用于有毒试剂。用完后丢弃。看起来有点舍不得像玻璃瓶。购买套件时,通常会收到其中一些瓶子。您可以收集它们,但是在许多情况下有帮助。\r\n第二个是标签。标记是强制性的任务。有些人喜欢用标记写标签。有两种类型:油性笔和水性笔,但是前者很难书写和清洗,而后者通常在潮湿时会消失。小心用油性笔书写。但是,这种方法有其缺点。这意味着下次您将此瓶与其他试剂一起使用时,笔迹将不容易洗掉,并且会有些混乱。您也可以在纸上书写并粘贴透明胶。通常使用宽粘合剂,这样它可以覆盖整个标签,并且在潮湿时不会影响书写。您也可以将其写在医用胶带上并粘贴。但是,该方法可能无法被水读取。可以根据需要选择这些方法。重要的是要指出

  日期必须在标签上!这样,您可以知道何时准备试剂。如果有问题,那就有证据。您还可以让其他用户知道它是否大致有效。

  第三是专注的准确性。浓度必须准确,并且需要注意一些事项。首先是正确选择仪器。与参考溶液一样,通常使用容量瓶,必须选择适当的规格。配一般试剂和量筒。切勿使用量杯。量杯是非常粗糙的指南。移液器*或微量注射器通常用于制备少量溶液。第二、可以将非常少量(通常少于5 mg)的一部分试剂与溶剂一起直接添加到存储容器中。例如,用于PCR和蛋白质电泳的某些试剂几乎看不见,因为它们仅少量安装在Doff管中。有些需要在制备之前进行高速离心,这导致非常少量的粉末沉积在试管底部。否则,一旦打开盖子,试剂粉将丢失。第三、确保准备好的试剂需要冷却至室温,并确保*终体积准确。例如,某些试剂在制备过程中需要加热至沸腾,并且会损失大量溶剂,因此必须在冷却至室温后添加其他溶剂。

  4是关于特殊要求的。某些试剂在制备前需要加热。例如,如果冰醋酸的温度低于16度,它将冻结,因此请在使用前缓慢加热。 DMSO中也会发生类似现象。某些试剂在制备后需要遮光。您可以选择黑色纸或黑色塑料包裹。有些试剂不是用水制备的,但是需要其他溶剂。实例:PMSF,用异丙醇制备。并在使用时添加到水中。因为它很快在水下失效。某些试剂在制备后需要过滤。注意连续的滤液。如果输入有误,则需要重复进行过滤,直到满足要求为止。进行原型制作后,大多数都需要冷藏并尽快使用。但是,有些可能需要冻结,具体取决于您的特定要求。一些试剂容易被氧化,通常会添加抗氧化剂。等:6-羟基多巴胺(6-OHDA),通常制备0.2%的维生素C水溶液。

  作为一般规则,关于试剂的使用应仅提及一些预防措施。

  一种是在准备后尽快使用它。由于大多数制备的试剂均为液体,因此它们的保质期比起始试剂要短,并且容易失效。因此,您应该在开始准备试剂之前就计划好实验,并且不要在开始之前长时间准备试剂。其次,当重复使用试剂时,应注意不要污染试剂。当通过移液*除去液体时,请小心*更换头。移液时,要小心清洗并丢弃多余的液体而不将其倒回瓶中。

  第三、不要在同一实验中使用不同批次的试剂。这是因为动物研究的重点是比较相同的事物。当使用不同的试剂时,差异的原因未知。因此,在制备试剂时,请尝试分配尽可能多的试剂。尝试在一个实验中运行多余的试剂,而不是用完。

  第四、如果要使用他人准备的试剂,则需要了解来源和相关信息。在同一实验室中进行相同类型的实验时,它们通常共享几种试剂。此时,您应该注意清楚地提出问题。否则,如果实验有问题,将会造成很大的损失。例如,进行蛋白质电泳时,使用的缓冲液,过硫酸铵和丙烯酰胺都是相同的,但比例不同。注意不要使用过期的试剂。第五、在试剂用完后必须清洗相关的炊具。使用后有些可能需要立即清洗,以免他人或自己被污染而误用。等:有毒的丙烯酰胺溶液。有些人在短时间内洗完所有工具。其余的液体没有清洗,因此很难长时间清洗。这是我们应该注意的事情。请注意这一点,因为某些实验室可能必须分开设备。就像吃饭后洗碗一样。这也应该是一个很好的实验方法。

  第七,我们来谈谈试剂存储中的常见问题和解决方案。

  在存储过程中,准备好的试剂有一些问题。有些可以在不影响使用的情况下进行少许处理,而另一些则可能无法连续使用,甚至会引起毒性。因此,了解可能降解的试剂的一般现象将有助于您了解一般规律并顺利解决实验问题。

  物理性质变化

  *常见的是沉淀或结晶,絮凝,颜色变化,粘度变化,发霉,异味

  沉淀或结晶:*常见的是某些缓冲剂..如果温度相对较低,某些物质可能是饱和溶液,而低温可能会使它们沉淀。恢复到室温时会溶解。例如,当我尝试制作包含多个氯化锌离子的溶液时,打开冰箱时会出现沉淀,而在室温下摇动时,它是透明的,不会干扰使用。考马斯亮蓝的制备不当可能导致出现蓝色沉淀。一般来说,避免适当调节乙醇浓度。

  絮凝剂的形成:有些物质在低温下会沉淀在絮凝剂上,通常不会影响使用。但是,请注意,如果絮状物是其他物质或菌丝体,则不能使用它们。含糖水溶液要特别小心。

  颜色变化:在准备过程中加热一段时间后,可能会发生这种变化。也可能是由于存放期间的暴露引起的。它也可能是由溶液中各种物质的相互作用引起的。颜色通常较深。例如,当我准备一种新化合物时,我并不事先知道,因此加热后它会立即融化,当我将其放入冰箱后,第二天它就会变成黄色。当我问到合成这种化合物的人时,在60度以上它是不稳定的。此外,颜色可能会褪色。等:一些染料溶液。粘度变化:某些聚合物质的“溶液”。实际上,聚合物是分散的而不是真正溶解的。等明胶溶液,如果制备时间过长,有些可能会变稀,这可能会导致明胶质量出现问题。

  模具生产:常见于含高糖水的溶液中。主要原因是存储不当。通常,在准备过程中要注意操作。冷却制剂后,它不会在短时间内形成霉菌。

  气味:这主要是由于以下事实:溶液中的物质相互反应产生气体,溶解的气体消失,固有的气味改变。像:产生氨味,失去乙酸味等

  B.化学性质的变化

  示例:PH值的变化,氧化性的丧失,还原性的丧失

  PH的变化:如果怀疑试剂有问题,可以测量其PH。如果超出正常范围,则认为已劣化。氧化性降低:当使用浓硫酸通过硫酸蒽法测量多糖含量时,发现所制备的试剂没有反应并且没有显示颜色。我在报纸上滴了一滴浓硫酸,发现报纸没有像往常一样被碳化。目前没有这种硫酸。通过简单的观察就可以确定试剂是否变质。同样,可以通过类似的测试来判断某些强氧化剂,例如过氧化氢。

  降低还原性能:还原性物质如维生素C通常在变质时变色。

  C生物特性的变化

  示例:酶失活,生物分子降解等。

  这种变化并不立即显现。当在实验过程中或实验完成后结果不令人满意时,通常会出现试剂问题。在“如何跟踪实验中的试剂问题”一章中将更详细地讨论此问题。我在这里不再重复。

  如何解决试剂存放问题?

  一般而言,除了一些不影响试剂使用的现象外,还需要重新配制试剂。

  第八,我们来谈谈有毒和危险试剂的制备和储存。

  首先,让我们了解毒性的基本常识。根据作用时间长短可分为急性毒性和长期毒性。根据其作用的分布,可将其分为局部毒性和全身毒性。

  根据其位置和机制,可以将其分类如下。

  脏器官毒性:例如:氯仿具有肝毒性; SDS粉末可沉积在肺中;

  血液毒性:等:苯具有血液毒性

  神经毒性:等等:丙烯酰胺 是神经毒性 致癌性:等:溴乙基锭会导致癌症,尿烷会导致癌症。

  其他毒性:过敏,皮肤刺激等。

  对我们来说了解毒性机制非常重要。这样,我们知道如何保护和处理有毒试剂。

  我不太在意某些器官的局部或慢性毒性。但是由于会导致血液,神经系统和致癌毒性的毒性,对我们来说这是*可怕的事情。实际上,只要您安全就可以。一些致癌物也应大胆谨慎使用。我们的身体不那么脆弱,我们的免疫系统正在运转。

  但是,进行必要的保护工作是*重要的。

  让我们谈谈在制备有毒试剂期间如何保护自己。

  1了解试剂的毒性机理。这是保护的基本前提。通常标记为有毒物质,其机理几乎是清楚的。通过这种方式,可以得出有关有毒试剂的*终结论。已经发现长期使用诸如氯仿之类的溶剂会引起脂肪肝。但是,当您使用它时,只需偶尔将它洒在皮肤上就可以进行护理,因此不必担心。如果过氧化氢的浓度不高,即使它粘附在皮肤上也不会造成太大损害,但是可能会轻微脱落。但是没有生命危险。相反,如果滴一滴致癌试剂,就会感到害怕。因此,要了解其毒性机理,我们知道什么是试剂,不必太在意或担心它。

  2为了了解常用毒物的性质和注意事项,对不同的毒物采取了不同的措施。例如,毒药是挥发性物质。戴上防毒面具,准备通风并盖紧。对于容易将粉尘带入肺部的物质,应戴上枪口并保持尽可能轻;要小心;对于可能致癌的物质,请戴上一次性手套..

  3 10,000人不怕了解中毒的症状,以防万一。通常不可能避免100%接触有毒物质。您需要了解一些成瘾症状。如:发红,疼痛,眼睛刺激,某些恶臭。如果沾到皮肤上,请用大量水冲洗。严重时,请去诊所或医院治疗。

  基于上述知识,让我们谈谈制备有毒试剂的注意事项。

  首先,有毒试剂的容器是专用的,并且需要一个醒目的徽标。对于许多有毒试剂,我们使用聚合物瓶,除非必须使用玻璃瓶。由于玻璃瓶总是被人们重复使用,因此有可能在没有人知道的情况下误用装有有毒试剂的瓶。红色标签通常用于指示“有毒!”并根据需要添加有毒符号。

  第二、准备有毒试剂的保护。首先,您通常需要一次性手套,并根据需要戴口罩和防毒面具。其次,试剂不应接触容器的外壁。试剂粘附到外壁后,每次使用后必须戴一次性手套。这样,带有有毒试剂的一次性手套可能会意外接触其他瓶子,从而增加污染程度。我们的方法通常是在外壁被污染时立即更换瓶子。这样,您可以直接将瓶壁拿在手中而不必担心。拧下盖子时,通常应将盖子朝上。这也可以减少污染的程度。第三、一旦准备好,污染物将及时送到指定地点。包括装有有毒试剂,手套和其他一次性设备的瓶子。第四、长时间暴露于有毒试剂的设备应放置在专用区域内。例如:用于PCR的电泳槽,长期暴露于电泳溶液,EB等的区域应固定在一定范围内,不应放置在任何地方。这将尽可能减少污染。

  第三、有毒试剂的制备应按照程序进行。注意与其他试剂反应会产生致癌物的试剂。示例:PCR中常用的试剂焦磷酸二乙酯(DEPC)与氨反应形成致癌物。但是,它通常用于浸泡和挥发芯片头。含Tris和DTT的试剂不能用DEPC处理,因为DEPC可以与胺和巯基反应。实际上这里所说的是一些潜在的致癌物。请在使用过程中注意禁忌症。

  让我们也简要地解释一下危险品试剂的制备。

  这里提到的危险物品主要是指在某些条件下可能爆炸的物质。等:

  危险物质,例如乙醚和苯胺,通常在低温,遮光和特定条件下使用。注意引起爆炸的条件。

  第九,让我们谈谈制备试剂的优化。

  通常,我们始终严格按照参考书,文献或试剂说明中的步骤制备试剂。但是,这些步骤可能有些棘手。那么您如何看待改进呢?有多快!达到似乎比平均实验更高的标准有什么要求?

  首先,您需要全面了解试剂原理和潜在问题。

  接下来,实验中需要改进一些元素。

  第三、您需要少量的试用经验。方法的改进不是一次性的练习,而是连续不断的迭代研究。制备

  试剂的主要优化方法如下。

  1混合试剂使用试剂进行检测时,必须准备多种试剂,并且必须连续且连续地将多种试剂添加到样品中。首先。由于添加的误差,各种试剂的比例每次可能不同。一些试剂,特别是用于检测酶的试剂。但是,如果您了解这些原理,则可以创建混合解决方案并一次性添加它们。例如,在酶反应实验中,底物及其缓冲液可以是几种试剂,但是通常可以在添加酶之前将它们作为混合物添加。这样一方面可以减少错误,另一方面可以节省时间。 2适当的浓度变化试剂手册以及特定实验方法的程序通常描述了应制备试剂的浓度。但是我并不是说这根本不能改变。在某些情况下,由于实验条件不同,可能会根据本书中的方法制备试剂,甚至可能无法获得实验结果。那么在什么情况下可以改变试剂的浓度呢?换句话说,为什么不根据书籍或文献自己进行更改?假设需要了解该方法的原理。例如,当进行蛋白质电泳并用考马斯亮蓝染色时,它可能不会染色。此时,您可以考虑增加Cooma的浓度或加载更多的蛋白质。另一个例子:给动物一个动物,就表明每个动物都有一定的能力。而且我们的剂量是不同的。因此,您需要针对不同情况调整密度,并且不要将密度复制到书籍或文学作品中。此外,当测量熊状蛋白质含量时,只要熊与蛋白质的比例为一定量即可。如果浓度在检测范围内,试剂不足会导致试剂和分析物的蛋白质含量降低2/3、甚至测量蛋白质含量。这些都是不同的。因此,如果您熟悉实验的原理和步骤,则可以不依赖本书而学习实验。

  3处的步骤已适当省略。对于浓度要求不正确的溶液,在制备过程中可以跳过某些步骤。这因人而异。我认为实验中有很多这样的情况。

  4试剂处方的改进前提是要对实验原理有充分的了解。更改了考马斯亮蓝的配方。当我*次开始蛋白质电泳时,我使用分子克隆配方进行制备,但并不总是被染色。真奇怪经过一段时间的探索,我认为这可能是Cooma的问题。装载的蛋白质量足够大,无法增加。所以我自己改变了库玛的配方。只要库玛液体中甲醇的比例增加,就证明它是结垢固体。因此,根据原始配方,我们准备了几种不同的Cooma溶液并尝试了一些粘合剂。选择一种浓度,该浓度不仅会弄脏颜色,还可以区分蛋白带的深度。这是我实验中的*高浓度。在许多情况下,实验室条件会有所不同,并且需要改进所使用的试剂。这本书只是一个粗略的标准。它很灵活。

  5寻找替代方案实验中使用的替代方案可能不及时。有些是别人赠予的,有些是邮寄的。但是,某些不太常用的试剂实际上会丢失一段时间。那么是否应该根据实验原理替代其他试剂?我想你能想到的。但是,基本上假设实验结果不会受到影响。这要求实验非常熟练,并且熟悉具体的实验程序和原理。通常情况下不建议使用此方法。

  第十,让我们谈谈如何追踪实验中由试剂引起的问题。

  有时可能不会立即很明显地发现试剂有问题。请记住,即使实验结果异常,试剂也可能有问题。在动物实验中,发现得越早,就越适合进行实验。等待实验完成并检查它通常是没有用的。动物实验有时很难重复。我们可以做的是在我们的实验中使用相同批次的试剂并比较所有动物。只有这样,您才能获得可靠的信息。

  首先,让我们谈谈如何避免试剂的实验问题。

  是为了确保试剂材料的可靠性。您需要使用导入的。*好去一家大型的知名公司。不要购买难以满足要求的省钱产品。例如,蛋白质电泳试剂中所含的丙烯酰胺和亚甲基可以原包装或以进口量进口,但不建议使用国内产品。中国制造的某些试剂可能不符合要求。当然,并非所有试剂都需要在中国生产。这在很大程度上取决于家用试剂的实验要求和质量标准。

  其次,不要经常更改试剂的品牌或制造商。在探索阶段,您可能想尝试各种您了解的试剂。但是,基本上需要对使用哪种试剂进行跟进。尤其是在大规模实验阶段,为确保实验中的结果相同,请不要急于一次性购买所需的试剂并一路丢失。不仅来自不同制造商的试剂不同,而且来自同一制造商的不同批次也可能不同。应特别注意生物学实验。

  第三、在试剂制备过程中尽量避免污染。一方面是微生物污染,另一方面是其他杂质。*苛刻的试剂通常是特殊的瓶子。更换试剂批次时,应清理*后一批。如果可能,请尝试奉献。如果您要共享试剂,请给他们提供详细信息或从他们那里获取详细信息。简而言之,请放心使用试剂。

  第四、准备试剂并按规定存放。这不是很明显。例如,***可以是用于动物标记的***解决方案,也可以是Bouin的解决方案。两者看起来都是相同的颜色。写一个好的徽标来区分它。另一个例子:PMSF使用异丙醇配制,并储存在-20°C下。

  五是注意试剂使用的操作程序。通常,实验室将创建相同的SOP以使用常用试剂。有些试剂有详细说明。我不认为每个人都错。使用前,详细询问是*基本的保修。

  但是,即使采取了这种预防措施,也很难避免实验中的某些问题。

  实际上,因为动物测试是生物学方面的,所以生物学变异性太大并且不可避免地会出现一些问题。我们要做的就是如何调查实验以找到问题的根源。

  有几种方法可以找到实验中的问题。  一种是日常检查方法。该方法证实了实验中所用试剂的基本化学性质和简单化学性质。示例:试剂在室温下已经是液体,是否需要冷冻? PH值是否在规定范围内?是否通过目视检查除去了试剂?颜色会改变吗?测量仪器干净吗?您是否使用了过期的试剂?等待。这些测试将使您立即了解实验失败的原因。但是,其中许多无法一次找到。这需要使用一些技能或手段进行逐步调查。  第二种是替换方法。这样做的方法是在实验的特定步骤重新配制试剂,或者用其他人准备的相同试剂运行试剂以确认实验结果。该方法的前提是某些试剂存在重大问题。示例:如果您怀疑蛋白质电泳过程中细胞裂解液有问题。您可以重写它或与他人一起尝试。这样您就可以找到一些信息。这是解决实验失败原因的*常见方法。第三种方法是加固。所谓的增强方法是放大因素之一、以查看其是否由试剂不足或样品量不足引起。这样,可以突出显示特定的剂量因子,以揭示试剂问题并消除因子。示例:蛋白质电泳未染色。我想知道是否是由于缺乏样品。此时,增加样本量。通常50 ug,研究实验可以是200、300 ug或更多。如果增加数量后颜色没有变化,则粘合剂表面可能变脏或变脏。至少这可能不是样本量小的原因。基于此,您可以进一步调查原因。  4是Guimyaofa。实验可能会导致非常意外的行为。这通常是所谓的“误报”的结果。目前,您可以使用Gimmfa找出原因。实际上,通常的方法是用空白(例如蒸馏水)代替测试样品,并按照标准程序检查结果。还是为什么不故意添加特定试剂?这是第二种方法。实际上,情况恰恰相反。帮助找到某些原因。应该说调理试剂的制备和使用是成功进行实验的前提。实验失败的原因只有三个。首先,样本本身存在问题。通常可以通过交换样品来确认。第二是试剂问题。这是*常见的一种。您可以使用上述方法进行故障排除。第三是操作问题。在这方面,请注意与实验的标准操作程序相比哪些步骤不正确。此外,整个过程可以追溯到经验丰富的人员,从而很容易调查原因。   11.准备*常用的缓冲区。那么您应该注意什么呢?首先,请注意添加每种试剂的顺序。像含钙试剂一样,它们通常在多组分缓冲液的末端添加。注意以前的准备工作的经验。接下来,请注意每种试剂成分的比例和浓度。可以通过将不同比例的相同试剂组合来制备不同的缓冲液。与PBS类似,有几种类型具有不同的缓冲范围。对于缓冲液,*重要的指标是pH。因此,有必要精确地测量PH值。使用准确的PH试纸或PH计进行测量。  第三、提防及时监控。缓冲区可以存储很长时间,但是通常不可用。因此,您应注意及时监控。*常用的方法是测量PH值。如果结果超出指定范围,则应将其丢弃。与膜片钳实验中的缓冲液相似,pH要求很高。第四、注意缓冲区的范围。与蛋白质电泳相似,浓缩的凝胶缓冲液的pH值为6.8,分离凝胶的pH值为8.8。不能混。同样,其他实验也应注意此问题。因此,当提及缓冲液时,我们也可能提及其pH。这是*重要的功能。另外,在使用试纸条测量pH值时,请注意使用范围。虐待和虐待可能导致难以置信的后果,并且可能产生误导。然后首先测试PH试纸是否过期。\r\n有几种方法可以找出实验中的问题。

  一种是常规检查方法。该方法证实了实验中所用试剂的基本和简单的化学性质。例如:试剂在室温下是否已经是液体,应该是果冻? PH值是否在规定范围内?目视检查是否清除了试剂?颜色会改变吗?测量仪器干净吗?您是否使用了过期的试剂?等等这些测试可以迅速告诉您实验失败的原因。但是,其中许多无法一次找到。这需要使用一些技能或手段进行逐步调查。

  第二种是替换方法。这样做的方法是在实验的特定步骤重新配制试剂,或使用其他人准备的相同试剂运行试剂以查看实验结果。该方法的前提是关于某些试剂存在主要问题。示例:如果您在进行蛋白质电泳时怀疑细胞裂解液有问题。您可以重新编写它或与他人一起尝试。这样就可以发现一些信息。这是解决实验失败原因的*常用方法。

  第三是加固方法。所谓的增强方法是放大因素之一、看是否是由于试剂或样品量不足所致。以这种方式,可以强调特定的剂量因子,这可以揭示试剂问题并由此消除该因子。示例:蛋白质电泳未染色。我想知道是否是由于缺乏样品。此时,增加样本量。通常为50 ug,调查实验可以为200、300 ug或更多。如果增加后颜色仍然没有变化,则可能是污点或粘合剂表面被污染。至少这可能不是样品量太少的原因。可以基于此进一步调查原因。

  4是Guimyaofa。实验有时会产生非常意外的行为。这通常是所谓的“误报”的结果。目前,您可以使用Gimmfa找出原因。实际上,通常的方法是用空白(如蒸馏水)代替实验样品,并按照标准程序检查结果。还是为什么不故意添加特定试剂?这是第二种方法。实际上,这是被反对的。帮助找到某些原因。应该说,调节试剂的制备和使用是成功进行实验的前提。实验失败只是三个原因:首先,样本本身存在问题。通常通过交换样品来确认。第二是试剂问题。这是*常见的一种。您可以使用上述方法进行故障排除。第三是操作问题。在这方面,请注意与实验的标准操作程序相比哪些步骤不正确。此外,可以将整个流程追溯到有经验的人员,从而很容易调查原因。

  11.准备常用的缓冲区我认为

  缓冲区*匹配。那么您需要注意什么呢?

  首先,请注意添加每种试剂材料的顺序。像含有钙离子的试剂一样,它们通常添加到多组分缓冲液的末端。注意您以前的准备经验。

  接下来,请注意每种试剂成分的比例和浓度。通过以不同比例组合相同的试剂可以制得不同的缓冲液。与PBS类似,有几种类型具有不同的缓冲范围。对于缓冲液,*重要的指标是pH。因此,有必要精确地测量PH值。使用准确的PH试纸或PH计进行测量。

  第三、注意及时监控。缓冲区可以存储很长时间,但是通常不可用。因此,您应注意及时监控。*常用的方法是测量PH值。如果结果超出指定范围,则应将其丢弃。与膜片钳实验中的缓冲液相似,pH要求很高。

  第四、注意缓冲区的范围。与蛋白质电泳相似,浓缩的凝胶缓冲液的pH值为6.8,分离凝胶的pH值为8.8。不能混。同样,其他实验也需要注意此问题。因此,当提及缓冲液时,我们也可能提及其pH值。这是*重要的功能。另外,在使用试纸条测量PH时,请注意其使用范围。滥用和滥用会导致难以置信的结果,并可能产生误导。然后首先测试PH试纸是否已过期。

  12.让我们谈谈生物试剂制备中的一些问题。\r\n生物试剂的制备具有独特的特点。\r\n一般来说,它具有以下特征:\r\n容易恶化和失败。许多生物试剂是酶。酶通常是蛋白质。溶液的pH值,环境温度,光线等都可能轻易影响其活性。因此,许多生物试剂需要冷冻保存。有些冷藏了,有些则冷冻在-20度。另外,请注意黑纸的阴影和PH值。\r\n第二个很容易被污染。通常,我们建议您不要手工接收它。通常,您应该戴一次性手套。手中的汗液,微生物甚至非特异性酶都可能影响生物试剂的活性。例如,大多数PCR试剂在执行PCR实验时都需要这样做。\r\n第三、许多试剂是有毒的。许多生物试剂会与细胞内的物质发生反应。难怪它对人体有毒。在准备和使用溴化乙锭(EB)时要特别小心。特别是一些潜在的致癌物。通常,可以小心地戴一次性手套。戴防毒面具。\r\n这意味着许多试剂反应都是“黑匣子”。在某些生物学实验中,仅在完成实验步骤后才会出现此问题。您可能一路上找不到问题。加入PCR等试剂后,谁能感觉到复杂的反应?请尝试想象。*终结果应通过电泳确认。因此,试剂制备必须严格控制且无错误。否则,调查非常繁琐。\r\n12、我们来谈谈生物试剂制备中的一些问题。

  生物试剂的制备具有独特的特性。

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