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中洪博元教您如何做好食管癌动物造模?

  食管癌从组织学上主要分为鳞状细胞癌(SCC)和腺癌(EAC),90%以上是SCC。

  食管癌动物模型主要有食管鳞癌动物模型和食管腺癌动物模型。

  食管鳞癌动物模型主要包括诱发性模型和移植性模型两种。诱发性模型主要通过亚硝胺类强致癌物诱发而成,移植性模型主要通过用人食管鳞状癌组织移植造成。

  食管腺癌动物模型的建立方法主要是通过手术方法造成食管返流,从而诱发食管腺癌,目前研究尚较少。

  食管鳞癌模型

  诱发性食管鳞癌模型

  【实验原理】亚硝胺类化合物是一类强致癌物,能引起多种动物多脏器的肿瘤。其中一些亚硝胺在动物特别是大鼠体内是较强的食管癌诱导剂,甲基苄基亚硝胺(NMBA)是这些化合物中对大鼠食管*强的致癌物。NMBA具有特殊的食管亲和性,它诱导的癌变仅限于食管,其具体机制尚不清楚。

  【实验材料】动物:Wistar大鼠,雌雄兼用,体重180g~220g。药物及试剂:甲基戊基亚硝胺、液体石蜡。

  【实验方法】大鼠于后肢皮下注射1%甲基戊基亚硝胺液体石蜡溶液5mg/kg,每周1次,连续15周。

  【实验结果】肉眼观察咽至胃的食道粘膜变化,有突起及乳头状瘤形成,组织学检查,食管粘膜有增生性病变、癌前病变、癌变。

  【注意事项】诱发性食管鳞癌模型的制作以大鼠为主,小鼠则较少应用。也有文献报道用盐酸肌氨酸乙酯和亚硝酸钠喂Wistar大鼠以造模。

  【评价】此模型常被用来研究一些化学预防剂的机制。由于NMBA诱导的大鼠食管癌模型在组织学上与人食管癌相似,所以对研究食管癌的化学预防及癌变机制非常有价值。

  移植性食管鳞癌模型

  【实验原理】利用人食管鳞癌(HEC2或Eca-109)的瘤组织接种于裸鼠建立食管癌动物模型。

  【实验材料】动物:BALB/C裸鼠,6~8周龄,SPF级,雌性。药物及试剂:人食管鳞状上皮癌细胞Eca-109株,人食管鳞状上皮癌细胞HEC2株。

  【实验方法】取直径约1cm的裸鼠移植人食管癌(HEC2或Eca-109)的瘤组织,切成1mm3左右小块,种植于裸鼠右侧腋窝皮下。

  【实验结果】肿瘤很快长到直径为3~4mm3,这时可用于药物筛选实验。

  【注意事项】①瘤组织切成1mm3左右小块用于实验移植;②瘤组织选取传代20代后的*佳。

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