目的:如何建立使用TaqMan探针荧光定量PCR技术对Leprdb/+小鼠后代进行基因分型的有效方法?
方法:设计一个突变位点(rs1801133),以提取228例Leprdb的鼠尾DNA/+ Lepr基因的小鼠后代,一对PCR引物和两个TaqMan探针?设置实时荧光PCR扩增的条件,并使用SDS软件输入SNP位点?您是否通过了一个2个月大的动物的肥胖表型验证来运行Hardy?温伯格平衡测试?
结果:通过建立的TaqMan探针荧光定量PCR方法检测了228个样品,其中GG基因型,基因型频率0.1929,GT基因型123、基因型频率0.5395、TT基因型64个41个基因型的频率是否为0.2807?将TaqMan探针荧光定量PCR方法的分型结果与肥胖表型的结果进行比较时,灵敏度为97.56%,特异性为99.47%吗?
结论:应用TaqMan探针荧光定量PCR技术可以实现Leprdb/+小鼠后代基因座的早期分型检测。