目的:构建全长成熟IL-37b的真核表达载体pEGFPN1/IL-37b,并检测其在RAW264.7细胞中的表达。
方法:使用含有IL-37b全长编码区基因的质粒pUBC/IL-37b构建能表达IL-37b全长和成熟形式的真核表达载体?构建了重组质粒pEGFPN1/IL-。将37b转染到RAW264.7细胞中,通过蛋白质印迹和共聚焦显微镜,全长和成熟IL-37b检测全长和成熟形式的IL-37b的表达。通过实时PCR检测类型并抑制IL诱导的IL-6表达。
结果:构建的pEGFPN1/IL-37b在转染后可在细胞内表达全长和成熟的IL-37b,并抑制LPS诱导的IL-6表达。
结论:成功构建了IL-37b全长成熟的真核表达载体。这为进一步研究IL-37b的抗炎作用和机制提供了坚实的基础。